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建立检测单增李斯特菌(LM)的快速检测方法,对人类健康及畜牧业生产具有重要的意义和应用前景。本研究选取致病性李斯特菌特异性蛋白—肌动蛋白聚合蛋白(ActA)为对象,利用原核表达系统表达ActA融合蛋白,以亲合层析纯化表达产物,获得了较高纯度的表达蛋白ActA。以纯化的ActA蛋白免疫小鼠进行免疫原性研究,结果表明ActA可激发机体产生特异性的细胞免疫和体液免疫,为以ActA蛋白为靶抗原,建立LM免疫学检测方法的研究及LM疫苗的研制奠定了基础。以LM为免疫抗原免疫Balb/c小鼠,以纯化的ActA蛋白作为ELISA检测的包被抗原,制备LM特异性单克隆抗体并进行特性分析,辛酸—硫酸铵法结合G—蛋白亲合层析法纯化单抗腹水,选取两株纯化的单抗分别用于免疫胶体金的标记和胶体金试纸检测线的包被,研制检测LM的胶体金试纸,研究结果表明该试纸具有较高的敏感性和特异性,可以从模拟样本中有效地检出LM。