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目的:比较胰岛素生长因子-1(IGF-1)对人脐静脉平滑肌细胞(HUVSMC)和脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)增殖的影响,并探讨其机制。
方法:本实验采用人源脐静脉平滑肌细胞(HUVSMC)和脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)进行研究。①检测浓度效应:将HUVSMC和HUASMC各分为7组,加入不同浓度的药物。分别为:对照组、IGF-1(20ng/ml)、IGF-l(50ng/ml)、IGF-1(100ng/ml)、IGF-1(150ng/ml)、IGF-1(200ng/ml)、wortmannin(200uM)。②检测时间效应:通过浓度效应实验分析出IGF-1的合适浓度,加入IGF-1检测0.5h,2h,12h,24h,48h后细胞增值及蛋白的表达。通过MTT法检测IGF-1对两种细胞增殖的影响,Western blotting技术检测IGF-1对两种细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路的影响。
结果:①不同浓度的IGF-1对HUVSMC和HUASMC的增殖均有明显的促进作用,但对HUVSMC的促增殖作用明显高于HUASMC。②进一步检测PI3K-Akt信号通路,IGF-1可激活PI3K-Akt信号通路,并且IGF-1对HUVSMC的激活明显强于HUASMC。③此外,我们利用IGF-1R抗体或P13K抑制剂wortmannin处理细胞后发现:IGF-1对细胞增殖的促进作用被明显抑制。
结论:本研究阐明了IGF-1在平滑肌细胞增殖中具有重要的促进作用,并且在HUVSMC更为明显。进一步实验发现IGF-1主要通过PI3K-Akt信号通路来促进平滑肌细胞的增殖。本文研究在一定程度上解释了搭桥术后静脉移植物比动脉有更大的发生内膜增生倾向的现象。