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红霉素(erythromycin,Er)是由糖多孢红霉菌(Streptomyces erythraea)合成的次生代谢产物,为14元大环内脂类抗生素。包括红霉素A(Er A)、红霉素B(Er B)、红霉素C(Er C)、红霉素D(Er D)、红霉素E(Er E)和红霉素F(Er F)。其中红霉素A(Er A)的抑菌活性最高。
依据糖多孢红霉菌合成红霉素的途径,以促进羟基化和甲基化为主要手段提高其产量。一方面,向发酵液中添加表面活性剂和氧载体,在一定程度上提高了溶氧,强化羟基化反应,从而有利于红霉素的生物合成和有效组分转化;另一方面,向发酵液中添加一些小分子有机溶剂,提高了P450酶的含量,有利于红霉素的生物合成。最后,红霉素的生物合成需进行甲基化,氯化胆碱的加入可能有利于红霉素D的甲基化,从而可在一定程度上提高红霉素有效组分ErA的相对百分含量。
本文对影响糖多孢红霉菌生产红霉素的甲基化因子和羟基化因子进行添加条件的优化。采用优化设计方法研究添加因子在红霉素A生物合成中的交互作用,运用正交设计和响应面设计对添加因子与红霉素A产量关系建立模型,结果显示:通过添加Triton-X100和氯化胆碱,可使最终发酵液的效价由对照组的4964U/ml提高到条件组的6079U/ml;ErA的相对百分含量由对照组的76.45%提高到条件组的94.18%;通过添加吐温-80和氯化胆碱,可使最终发酵液的效价由对照组的5117U/mL提高到条件组的6162U/ml,ErA的相对百分含量由对照组的76.45%提高到条件组的92.39%。在一定程度上实现了红霉素生产及其有效组分转化的优化。