市售食用花卉生物活性成分含量测定及其水提物抗氧化活性研究

来源 :东南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:da330136324
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
我国具有丰富的天然食用花卉资源和大量的食用花卉文献记载,食用花卉在我国的应用已历史悠久,它们的功效和安全性亦比较明确,某些食用花卉的功效与其生物活性成分及其抗氧化作用密切相关,常见食用花卉中的生物活性成分有酚类、黄酮类、皂苷类、多糖类、有机酸类、萜烯类化合物等。   本实验旨在研究不同食用花卉中生物活性成分的含量,分析其水提物的抗氧化活性,并探讨其抗氧化机制,为今后系统研究食用花卉生物活性物质及其开发利用奠定一定的理论基础。   目的:测定12种市售食用花卉中包括总黄酮、总皂苷和总甾体在内的生物活性成分的含量;分析其水提物的体外抗氧化活性及其对高脂血症大鼠的抗氧化作用,并利用大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧再给氧模型探讨其可能的抗氧化机制。   方法:(1)利用乙醇回流提取,NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法测定食用花卉总黄酮的含量;利用超声提取,香草醛-冰醋酸-硫酸分光光度法测定食刖花卉总皂苷的含量;利用石油醚回流提取,Liebermann-Burchard显色法测定食用花卉总甾体的含量。(2)分别利用Fe3+还原试剂盒,Fenton反应试剂盒、黄嘌呤氧化酶反应试剂盒及氧化自由基吸收能力(ORAC)方法进行食用花卉水提物的总抗氧化活性、清除·OH、O2-能力及氧化自由基吸收能力的测定。(3)喂饲高脂饲料(饲料配方参照美国营养学会推荐的AIN-93M试验动物合成饲料配方配制而成,该配方中的蛋白质、脂肪、维生素、矿物质的含量是保证动物生长发育所必需的,在此基础上适当调整蛋白质和蔗糖的比例,增加饱和脂肪含量,制成高脂饲料)建立高脂血症大鼠模型,观察12种市售食用花卉水提物对高脂血症大鼠的保护作用。实验大鼠共分14组:阴性对照组,模型对照组,12种市售食用花卉水提物组(12组),除阴性对照组外其余各组均饲以高脂饲料,受试物各组分别给予不同的食用花卉水提物灌胃,连续喂养6周,测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平及其氧化自由基吸收能力,并取肝脏作病理切片。(4)采用第三代大鼠乳鼠心肌微血管内皮细胞,建立细胞缺氧/复氧模型,观察食用花卉水提物预处理对血管内皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。实验分为14组:①空白对照组:DMEM完全培养基,饱和湿度的二氧化碳培养箱中培养2小时;②模型对照组:缺氧1h复氧1h;③食用花卉水提物组(12组):每组分别加入不同的食用花卉水提物750μ gL-1(DMEM完全培养基配制)孵育24小时后,缺氧1h复氧1h;然后,收集细胞上清液,待测其中SOD,MDA,乳酸脱氢酶(LDH)指标,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡。   结果:(1)生物活性成分测定的结果表明:所测12种食用花卉中均含有总黄酮、总皂苷和总甾体,但其含量差异较大,总黄酮含量最高的是丁香,为13.06%,野菊花(12.14%)、花卉槐花(10.09%)、茉莉花(10.09%)次之,栀子最低,仅为1.33%;总皂苷的含量以栀子最高,为4.19%,茉莉花(3.53%)、野菊花(2.20%)、迷迭香(1.54%)次之,花卉红花最低,仅为0.32%;总甾体的含量以野菊花最高,为1.02%,花卉红花(0.85%)、菊花(0.78%)次之,勿忘我最低,其总甾体含量仅为0.10%。   (2)体外抗氧化实验结果表明:总抗氧化能力最强的是金银花,为2205.21U/g,迷迭香、丁香、勿忘我次之,厚朴花、茉莉花最低,最强最弱相差4.26倍;清除·OH的能力以野菊花、菊花、勿忘我较强,均在1100U/g,丁香、花卉玫瑰最弱;清除O2-的能力以花卉玫瑰、迷迭香、菊花较强,丁香、栀子较弱,栀子的清除O2-能力仅为103.2U/g:花卉玫瑰的氧化自由基吸收能力最强,为861.87μmoleTE/g,丁香、迷迭香、花卉槐花次之,茉莉花的ORAC值最低。花卉水提物中总黄酮的含量与其总抗氧化活性之间存在相关性,R为0.585。(3)动物实验结果表明:与高脂模型对照组相比,上述12种食用花卉水提物能不同程度降低高脂血症大鼠TG、TC、LDL-C水平,升高血清HDL-C这一保护性因子水平,而且能够降低血清中MDA水平,提高SOD、GSH-PX活性及其ORAC值,减轻大鼠肝脏脂肪变性程度,效果以野菊花、厚朴花、菊花、花卉红花等水提物组较为明显。同时体外细胞实验结果表明,食用花卉水提物预处理能不同程度提高缺氧/复氧后细胞存活率,减少LDH,MDA释放,提高SOD活性,野菊花、菊花和花卉红花水提物能明显减轻受损细胞的凋亡。   结论:(1)利用分光光度法测定了食用花卉中主要生物活性成分总黄酮、总皂苷和总甾体的含量,丰富了国内外对于食用花卉的成分研究,为食用花卉的进一步开发利用打下了基础。(2)体外抗氧化实验结果提示食用花卉水提物具有一定的总抗氧化能力、清除羟基自由基能力、清除超氧阴离子自由基和氧化自由基吸收的能力,同时水提物中总黄酮的含量与其总抗氧化活性之间存在相关性,表明黄酮类物质可能是其重要的功能成分,但也不排除多种抗氧化成分之间通过相加或协同作用发挥生理功能。(3)食用花卉水提物对高脂血症大鼠具有较好的调节作用,可能通过提高其脂代谢关键酶活性、调节载脂蛋白的分泌等发挥改善脂代谢异常、减轻肝脏脂肪变性的作用,同时食用花卉水提物对大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤亦具有保护作用,其机制可能与增强内源性抗氧化酶的活性、减轻受损细胞凋亡有关。
其他文献
覆盖测试是对测试过程的度量,这个度量直接关系到软件的开发、集成和测试等操作的各个阶段.而控制流图在软件测试中起着非常重要的作用,并且基于控制流图的覆盖数据是很容易
研究背景催乳素是垂体前叶分泌的多肽类激素,具有多种生物学功能。基因阻断实验证明它在腺体形成、泌乳及乳蛋白基因的表达方面发挥重要的作用。生长激素受体是催乳素和生长
潮褐土是北京农业地区的重要土类之一,它不但分布面积广而且肥力差异大。本文是研究三种混合肥料(普通型、高磷型、缺钾型)在潮褐土的三种肥力水上,对大麦的反应,对大麦籽粒
目的:探讨结肠直肠淋巴管瘤的诊断和治疗。方法 :报道本院收治的2例结肠淋巴管瘤病例,并检索中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库及万方医学网中有关结肠直肠淋巴管
近年来,民生问题成为社会各界议论的热门话题。关注民生,是“立党为公、执政为民”理念的深化,是构建社会主义和谐社会的现实需要,是广大人民群众的 In recent years, peopl
作为基层医院是评价和衡量医院技术管理方面的重要依据,是有关病人资料的汇总,是病人在医院诊断、治疗、护理、手术等过程中的记录。一方面,随着科技发展,新技术、新项目在临床医
我国华北、西北地区都是油用亚麻产区。栽培油用亚麻不仅要求单位面积种子产量高,还要求种子含油量高。据各地资料报导和本所分析结果,都证明了,亚麻的类型、品种性状及栽培
随着成人高等教育的不断发展,成人教育档案在成人教育事业及社会活动中的重要性日益明显。建立完善的成人教育档案,使其内容更加丰富、门类更加齐 With the continuous deve
一、新台田增产概况在“排、台、改、灌、林”综合防涝治碱方针的指导下,1964年冬到1965年春我省洼涝盐碱地区开展了轰轰烈烈的修筑台田、条田(沟洫畦田)的群众运动。据统计