二硫化碳（Carbon Disulfide，CS₂）为脂溶性易挥发液体，作为常用的有机溶剂和工业原料，已广泛用于轻纺工业、化工和制药工业，是生产粘胶人造丝和玻璃纸等产品的原料，也是实验室常用的溶剂。目前，因产业调整，接触CS₂的工人种类愈来愈多并且主要集中在发展中国家。据不完全调查，直接接触CS₂工人在中国有12万人，世界范围内有近50万人，因此研究二硫化碳健康效应有着重要意义。 自19世纪二硫化碳应用于工业生产以来，众多流行病学研究表明职业性高剂量暴露二硫化碳对工人的神经、心血管、生殖、血液和呼吸等系统均有毒性。但以往的研究主要立足于细胞和人群生化水平，较少涉及分子水平且毒性机理不清。50年代至今，随着生产技术的提高和工业条件的改善，因职业性高剂量暴露二硫化碳所致事件的发生率急剧减少，而长期接触低浓度CS₂所致的慢性健康效应变得越来越严重。目前，长期接触低浓度CS₂的健康效应是研究的热点和难点，且在低浓度下（特别是卫生标准以下）长期接触CS₂对人体细胞的DNA是否有损害也值得深入研究。 国内外有关CS₂的遗传毒性效应的研究报道很少。国外研究大部分均报道CS₂无遗传毒性效应。近年来，国内虽有文献报道CS₂对人体细胞DNA有一定损伤，可使染色体畸变率增高，微核试验也呈阳性结果，但各研究所使用的生物材料、染毒方法和剂量均不一致，且其毒作用机理也不详。这在一定程度上影响了对二硫化碳遗传毒性的正确评价。 本研究从分子流行病学角度出发，采用单细胞凝胶电泳、PCR-SSCP分析、基因测序和PCR—RFLP基因多态性分析等技术对CS₂所致DNA损伤、基因突变等效应及其机制进行探讨，旨在从分子流行病学水平探讨CS₂遗传毒性效应，为职业暴露人群的筛选、高危人群的健康保护提供依据，以达到进一步保护CS2接触者健康的目的。 目的 应用彗星试验（Comet Assay）、PCR-单链构象多态性（PCR-SSCP）分析和基因测序方法检测长期低浓度二硫化碳接触所致DNA损伤和基因突变等遗传毒性效应及其机制。 方法 在湖北省某大型化纤厂随机抽取90例二硫化碳接触工人作为暴露组，同时选择81例非接触工人作为对照组，用无菌竹棒采集口腔粘膜细胞进行彗星试验、PcR一sscP分析、基因测序以及PcR一RFLP分析。此外，还由法国南锡大学采用基因测序技术对p53基因密码子273进行突变检测。 结果彗星试验结果显示，暴露组和对照组的彗星细胞拖尾率分别为0.51%和0.23%，经x’检验，差异有极显著性（只0.01）。另外，低作业年限暴露组、男性暴露组彗星细胞拖尾率均显著高于对照组（只0.01）。经多因素非条件logistic回归分析发现，CSZ暴露组DNA损伤明显高于对照组（只0.05）。PCR一SSCP分析结果显示，暴露组p53基因突变率为42.0%，对照组为18.7%，xZ检验差异有非常显著性（P<0.01）。经多因素非条件Logistic回归分析结果显示，CSZ暴露因素两组间有非常显著性差异（P<0 .01）。经基因测序，结果发现，外显子5中有一个突变碱基（由GCT突变为G以），外显子6中有3个突变（由CAA突变为从C，CTG突变为ATA）。法国实验结果显示，暴露组p53基因密码子273突变率为42.9%，而非暴露组为24.6%，xZ检验差异有显著性（户0.023）。多因素非条件Logistic回归分析结果显示，csZ暴露因素两组间P53基因密码子273突变率有显著性差异（P<0，05），与PCR一SSCP技术结果一致。 结论长期低浓度接触二硫化碳对工人口腔粘膜细胞的DNA有一定损伤，会导致，P53基因突变，其影响不容忽视。但未能证实这种损伤与作业年限、性别有关。其机制可能为自由基理论、共价结合理论和钙稳态失调理论。