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点击化学是由诺贝尔化学奖获得者美国化学家Sharpless提出的一种新的合成方法,其中最主要的一类点击化学反应是Cu((Ⅰ))化合物催化叠氮化合物与炔基化合物反应生成1,2,3-三唑五元环化合物,该方法产量高、副反应少、反应条件温和。本论文应用此类点击化学反应致力于合成新型的β-环糊精衍生物固定相,在HPLC中考察这些环糊精衍生物固定相对手性化合物的拆分能力。
首先,制备了三种结构明确的β-环糊精衍生物,通过点击反应将其分别键合到炔化硅胶表面得到了三种新型的β-环糊精衍生物手性固定相(分别标记为CCN-CSP、CDA-CSP和DMP-CSP),湿法装柱得到三种新型的手性柱。元素分析考察手性选择剂在固定相上键合量,通过热重分析研究了三种新型固定相的热稳定性。元素分析中碳含量按CCN-CSP、CDA-CSP、DMP-CSP依次增加,说明在相应的固定相中,β-环糊精衍生物的键合量依次增加。然后,以正己烷/异丙醇=90/10(V/V)为流动相、流速为0.5ml/min的条件下,考察三种新型手性柱的柱效。最后,考察了这三种手性柱拆分1-(4-氯苯基)乙醇的能力,其在DMP-CSP柱上的分离效果最好(Rs达到5.29),CCN-CSP柱次之(Rs=3.09),在CDA-CSP柱上Rs仅为1.11。
然后,研究这三种β-环糊精衍生物手性柱对4-苯基-2-恶唑烷硫酮(简称为L-苯)、甘草素、安息香、两种芳香醇、阿托品、伏立康唑和氯吡格雷这几种手性样品的拆分性能。除阿托品外,前五种样品在CDA-CSP柱上基本都实现基线分离,其中2-溴-1-(4-氯苯基)乙醇的分离度达到2.53。特别是安息香,在文献报道的点击全苯基氨基甲酸酯化环糊精手性固定相中分离效果很差,但在CDA-CSP柱上基本实现基线分离。4-氯苯基乙醇在CCN-CSP上可以得到较好拆分,而其对伏立康唑和氯吡格雷也均显示出一定的分离趋势。安息香和4-氯苯基乙醇在CCN-CSP上均可以得到较好拆分。
最后,在DMP-CSP手性柱上考察了进样量、流速和有机改性剂的比例等条件对其分离性能的影响。结果表明,(1)分离度随进样量的增加而减小。进样量较低时,溶质分子与固定相充分作用的机会大,分离度增大;进样量增大后,两者作用机会降低,分离度减小。(2)流动相流速增加导致溶质的分离度降低。流动相的流速影响溶质与固定相的作用时间,流速越小,溶质在色谱柱中停留的时间越长,与固定相作用越充分,分离度越大。反之,;两者作用越不充分,分离度越小。(3)随着流动相中甲醇含量的增加,流动相的洗脱能力增强,溶质的保留因子随之减小,分离度减小。