论文部分内容阅读
本研究由4～7周胚胎中分离出人PGC，在体外培养下形成表达人EG细胞标志的细胞集落；对PGC原代培养集落进行诱导，产生增殖能力较强、具有向三胚层分化潜能的原始生殖细胞来源的前体细胞系(PGCP)；将PGCP细胞系移植入胎羊体内，观察其在胎羊体内向肝脏细胞分化的潜能。本论文分为三部分：第一部分，人原始生殖细胞的分离、培养及鉴定。由4～7周人流产胚胎的肠系膜及生殖嵴分离出人PGC细胞。第二部分：人PGC细胞来源的PGCP细胞系。经RT-PCR检测人EG细胞相关基因表达阳性的原代培养细胞集落，在EBM-2培养液中诱导培养，建立PGCP细胞系。第三部分：PGCP细胞在胎羊体内向肝脏细胞的分化。在B超引导下经皮穿刺，将0.3～3×107的PGCP细胞移植入发育40～70天胎羊的腹腔/肝脏内。 结论：1.由早期胚胎分离出的人PGC细胞，体外培养可形成表达人EG细胞相关标志的细胞集落。2.本实验室建立的PGCP细胞系，在体外培养条件下有较强的增殖能力和向多胚层分化的潜能，其中向肝细胞分化的趋势较明显，而且无致瘤性和鼠源细胞污染，是一种较安全、有希望应用于临床治疗的干细胞系。3.PGCP细胞系在羊胚体内可分化形成肝细胞、胆管细胞。这些结果为人EG细胞作为全能干细胞应用于临床治疗提供了理论和实践依据。