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目的:
Paraoxonase(PON1)是一个钙离子依赖的酯酶，它可以水解包括有机磷类，芳香酯类在内的多种化合物。在本研究中，通过对传统血清PON1提纯中的离子交换步骤进行条件优化，寻找PON1提纯中最佳离子交换层析PH值。
方法:
使用Cibacron Blue F3GA琼脂糖的假亲和层析得到初步分离富含PON1的Cibacron流分，选定DEAE Sepharose Fast Flow为离子交换层析介质，通过AKTApurifier全自动层析仪，在PH值分别为7.0，7.5，8.0，8.5，9.0，9.5条件下对Cibacron流分进行离子交换层析。通过结合AKTA purifier记录的层析图谱，含PON1活性成分的SDS-PAGE凝胶电泳分析层析结果及PON1酶活性监测，综合分析得到优化的PH值。
结果:
1、AKTA purifier记录的层析图谱显示，以DEAE Sepharose Fast Flow为介质的阴离子交换层析，在分离含有PON1的Cibacron Blue流分中，较高的PH值有利于蛋白质的分离。
2、表明随PH值增加，PON1与杂质蛋白质逐渐分离，PON1浓度相对蓄积，PH值为9.0及9.5条件下没有额外杂质蛋白质由PON1活性峰分离。
3、PH值为9.0和9.5条件下得到高纯度的PON1，达到经典方案中的纯化效果。
结论:
PON1纯化过程中，在PH值>=9.0条件下，以DEAE Sepharose Fast Flow为介质进行的离子交换层析，只需一步就可以达到经典方案中的两步离子交换层析的效果。