外源精胺预处理提高白三叶抗旱性效应及机理研究

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本研究以‘拉丁诺’和‘海发’两个白三叶(Ttrifolium repens)品种为试验材料,采用聚乙二醇(PEG-6000)渗透剂处理模拟干旱胁迫,以直接干旱胁迫为对照,通过根施适宜浓度的精胺(Spm)进行预处理,探讨外源精胺诱导白三叶抗旱性效应及其机理。主要研究结果如下:(1)干旱胁迫下,外源Spm预处理延缓了白三叶叶片的衰老,提高了其抗旱性。在胁迫期间,经Spm预处理的两个白三叶品种的叶片相对含水量、叶绿素含量显著高于未经预处理材料;而电解质渗透率和丙二醛含量则与之相反。(2)随干旱胁迫时间延长,两个白三叶品种的SOD和APX活性逐渐升高,CAT活性变化不明显,POD活性先升高后降低。而经Spm预处理材料的4种抗氧化酶活性均显著高于未经预处理材料。(3)不同处理白三叶叶片的可溶性糖含量随干旱胁迫的持续而不断增加,除‘拉丁诺’两个处理间6d时差异不显著外,其余时期,两品种经Spm预处理材料的可溶性糖含量显著高于未经预处理材料。胁迫期间,与未经预处理材料相比,‘拉丁诺’经Spm预处理材料的可溶性糖含量在Od、9d时显著增高,蔗糖含量在6d、9d时,果糖含量在9d时亦显著增高,而山梨醇含量则是在6d时显著降低;对‘海发’而言,还原糖和葡萄糖在6d、9d时,果糖、蔗糖和山梨醇在9d时显著增高。不同处理蔗糖合成酶活性随时间变化不明显,而蔗糖磷酸合成酶和山梨醇脱氢酶活性则呈上升趋势,但Spm预处理显著降低了两品种蔗糖合成酶的活性,增强了蔗糖磷酸合成酶和山梨醇脱氢酶活性。(4) Western Blot杂交显示,‘拉丁诺’在干旱胁迫期间表达22、23和33KDa脱水蛋白表,其中33Kda蛋白表达随胁迫时间延长而增强,且Spm预处理对该蛋白的表达有显著的促进作用。‘海发’表达22和30KDa脱水蛋白,Spm预处理显著促进了30KDa蛋白在胁迫期间的表达。(5)荧光定量PCR分析表明,‘拉丁诺’的Y2K和SK2基因表达在胁迫期间呈下调趋势,但Spm预处理对Y2K和SK2基因表达有显著促进作用;‘海发’的三种脱水蛋白基因表达在0-6d时基本不变,仅在胁迫9d时略有下调,Spm预处理在肋、迫6d时显著下调了三种基因表达,而9d时显著上调了三种基因表达。
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