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【目的】本研究旨在利用过表达及抑制性腺相关病毒调控大鼠脑缺血组织中netrin-1(神经营养因子1)的表达,以探讨nerin-1在促进脑缺血后神经结构重塑和功能重建中的作用及可能分子机制。【方法】1、重组netrin-1过表达腺相关病毒载体及重组netrin-1 RNAi干扰腺相关病毒载体的构建、筛选和包装。2、清洁级成年SD大鼠(8周龄)随机分为5组:假手术组、MCAO组、MCAO+空病毒组、MCAO+netrin-1过表达组、mcao+netrin-1 RNAi干扰组,每组n=12。3、采用改良的Zea-Longa线栓法,构建大鼠大脑中动脉闭塞模型(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)。4、对于空病毒对照组,MCAO+netrin-1过表达组、MCAO+netrin-1干扰组,在行MCAO术前14d在立体定位仪上进行皮质下纹状体注射相关病毒。采用western-bolt法检测病毒转染后调控netrin-1表达量的效果。5、采用修正的神经行为学评分(m Nss评分),改良贴纸去除试验判断netrin-1对脑缺血后神经功能恢复的影响。6、MCAO术后14d进行灌注取脑,western-Blot检测缺血周边区脑组织Netrin-1、NF-200(神经丝蛋白-200)、SYN(突触素)、PSD-95(突触后致密物质95)表达情况7:免疫荧光观察缺血周边区大脑皮质NF-200表达情况。【结果】1.Western-blot法结果显示:相关病毒成功转染SD大鼠脑组织,重组netirin-1过表达腺相关病毒载体干预后大鼠脑组织netrin-1表达增加,重组netrin-1-RNAi腺相关病毒干预后netrin-1表达减少。2.Netrin-1过表达组大鼠在7d、10d、14d(P<0.05)神经功能评分明显优于netrin-1干扰组及MCAO组3.Western-blot法显示与MCAO组及netrin-1干扰组相比,netrin-1过表达组NF-200、突触素及PSD-95表达明显增高(P<0.05),netrin-1干扰组NF-200、Syn表达较模型组及Netrin-1过表达组降低(P<0.05)4.免疫荧光法结果显示netrin-1过表达组的NF-200分布较MCAO组及netrin-1抑制组更为密集,形态规整。【结论】netrin-1对脑缺血后的神经功能恢复及轴突再生有促进作用,这一作用可能与NF-200、SYN及PSD-95的表达量变化有关。