小黑杨单倍体耐盐基因(Bet-A)遗传转化的研究

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土壤盐渍化是影响农林业生产和生态环境的严重问题.植物耐盐机理和耐盐植物的选育研究已成为当今研究的热点.甘氨酸甜菜碱(glycine betaine)是一种重要的调渗物质,在盐胁迫下有些植物能通过体内甘氨酸甜菜碱的积累保护细胞内蛋白质的结构和功能,降低细胞水热,从而来增加自身的耐盐能力.因此甜菜碱合成酶基因被认为是最重要和最有希望的盐胁迫抗性基因.源于大肠杆菌(Escherichia coli)的胆碱脱氢酶(cholinedehydrogenase,CDH)能有效催化甘氨酸甜菜碱的合成.该实验以农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)为介导进行遗传转化,将编码CDH的耐盐基因(Bet-A)导入小黑杨(Populussimonii×P.nigra)单倍体植株(haploid)的基因组内,以期获得耐盐植株.实验中对小黑杨单倍体组培系统进行了优化,并探讨了影响转化率的几个因素如pH值等.最终得到四个转化株系,经PCR检测,全部产生特异性扩增谱带,证明Bet-A基因已整合进小黑杨单倍体植株的基因组中.
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