论文部分内容阅读
目的:现在临床应用的抗真菌药多为化学合成药,虽然效果较好,但价格昂贵并伴有严重的不良反应,且长期应用易产生耐药性。寻找一种资源丰富,提取工艺成熟稳定,质量可控,使用方便,安全有效的抗真菌作用的中药,具有重要的实用价值。姜油树脂是采用超临界流体萃取技术,从生姜中提取的棕红色黏绸油状液体,是生姜中全部有效成分的浓缩。本文的主要研究目的是: 1.考察姜油树脂体外抗皮肤癣菌的活性。2.根据姜油树脂的物理化学特性,研制适合临床应用的稳定的姜油树脂制剂的处方。3.考察姜油树脂凝胶制剂的皮肤刺激性,过敏性,以及局部涂搽抗皮肤癣菌的活性。4.制定姜油树脂凝胶制剂的质量控制标准。方法:1.采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)在2003年新推出的产孢丝状真菌抗真菌药物敏感性试验方案,即M38-A方案中的微量稀释法,研究姜油树脂对常见皮肤癣菌的抑菌试验及测定最小抑菌浓度(MIC)。2.采用正交设计试验考察卡波姆-940的用量,甘油浓度以及吐温-80浓度对姜油树脂凝胶的外观和稳定性的影响。3.根据《新药临床前研究指导原则》的相关规定,测定姜油树脂凝胶的皮肤刺激强度及致敏率;采用砂纸造模法将须癣毛癣菌接种在豚鼠背部皮肤上,建立动物模型,观察姜油树脂凝胶对豚鼠皮损的治疗及皮肤病理的改变。4.以6-姜酚为对照品,采用高效液相色谱仪,色谱柱为HYPERSIL BDS C18(5μm 4.6mm×250mm)加预柱,流动相为甲醇:水=65:35,检测波长280nm,测定姜油树脂凝胶中6-姜酚的含量,制定姜油树脂凝胶的质量控制标准。结果:1.姜油树脂对皮肤癣菌的总体MIC值为0.0002%～0.0032%;对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌、絮状表皮癣菌的MIC值分别为0.0002%～0.0008%、0.0008%～0.0032%、0.0002%～0.0016%及0.0004%～0.0008%。2.姜油树脂凝胶剂处方的最佳组合为:1g/100ml的卡波姆-940,5%的甘油,3%的吐温-80,其制成的制剂质地均匀,细腻,黏度适中,涂展性好;4000r/min离心60min,稳定,无分层现象;室温放置3个月,本制剂外观和涂展性无明显变化。3.姜油树脂凝胶对豚鼠皮肤用药,无任何红斑和水肿生成,无任何刺激作用;姜油树脂凝胶对豚鼠皮肤的致敏率为0%,无任何致敏作用;对于须癣毛癣菌建立的动物模型,生理盐水组治愈率为0%;基质组治愈率为16.7%;达克宁组治愈率为75%;10%姜油树脂凝胶治愈率为75%;15%,20%姜油树脂凝胶治愈率均为100%。4. 6-姜酚的线性范围是0.06mg/ml～1.2mg/ml,r=0.9999;精密度、重复性、稳定性的RSD值均小于2%,平均回收率为98.30%,RSD=0.95%。结论:1.姜油树脂体外抗皮肤癣菌效果良好。2.姜油树脂凝胶剂稳定性良好。3.姜油树脂凝胶的皮肤刺激性和致敏率均符合相关要求;15%,20%的姜油树脂凝胶对须癣毛癣菌所造成的体癣模型有完全治愈的效果。4.本实验建立的测定姜油树脂凝胶中6-姜酚含量的高效液相色谱法,操作简单,结果可靠,可以作为姜油树脂凝胶的质量控制标准。