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目的：本次实验我们选用7株不同来源（胃癌淋巴结转移，胃癌肝转移，胃癌腹水转移和胃癌组织转移）、不同分化程度的胃癌细胞和1株正常胃黏膜细胞，系统研究胃癌细胞中是否存在Ras家族新成员—ERas基因mRNA全长的表达及表达差异，分析ERas基因全长的突变情况以及其对胃癌细胞增殖，迁移和克隆形成能力的影响；同时系统研究传统Ras家族成员Kras，Hras和Nras基因在人胃癌细胞中的表达,分析突变热点12，13，61位密码子的突变情况，从而进一步探索Ras基因在胃癌发生发展中所起到的作用。 方法：实验运用RT-PCR检测7株胃癌细胞（MKN-28，MN-45，BGC-823，NCL-N87，SNU-16，SGC-7901，AGS）和1株正常胃黏膜细胞（GES-1）中ERas基因全长转录本的表达，测序分析ERas基因全长是否存在突变，real-time PCR检测 ERas基因表达水平差异，从中筛选出两株高表达 ERas基因的胃癌细胞MKN-28和 BGC-823；进一步利用 siRNA沉默 ERas基因表达后，分别通过CCK-8，Transwell，细胞划痕和克隆形成实验观察ERas基因对胃癌细胞增殖，迁移，克隆形成能力的影响。运用RT-PCR的方法检测Kras，Hras和Nras基因在上述8株细胞中的表达情况，并对其突变热点12，13，61位密码子进行测序分析，观察是否存在突变。 结果：在上述7株胃癌细胞中均检测到ERas基因全长转录本，且呈差异性表达，BGC-823，MKN-28，SNU-16和SGC-7901细胞中表达水平较高，分别是正常胃黏膜GES-1细胞表达水平的89.26倍，20.25倍，5.46倍和4.27倍；首次测序证实上述7株胃癌细胞中该基因全长不存在突变；利用siRNA沉默MKN-28和BGC-823中的ERas基因，通过CCK-8实验证实敲除ERas基因后胃癌细胞的增殖能力降低，MKN-28细胞转染 siRNA30，siRNA32后72 h OD值分别由1.60±0.05降至1.28±0.10（P<0.01）和1.35±0.10（P<0.01），96h OD值分别由2.09±0.09降至1.74±0.10（P<0.01）和1.64±0.11（P<0.01）；BGC-823细胞转染siRNA30，siRNA32后72 h OD值分别由0.64±0.18降至0.30±0.08（P<0.01）和0.40±0.10（P<0.05），96 h OD值分别由1.57±0.07降至1.00±0.46（P<0.05）和1.20±0.19（P<0.01）；Transwell实验证实敲除 ERas基因后胃癌细胞的迁移能力减弱，MKN-28细胞转染 siRNA30，siRNA32后24 h迁移的细胞数目分别由163.5±9.19降至62.50±7.78（P<0.01）和71±11.31（P<0.05），48h后分别由350.5±13.44降至130.50±13.44（P<0.01）和146.5±12.02（P<0.01）；BGC-823细胞转染 siRNA30，siRNA32后24 h迁移的细胞数目分别由155.50±9.19降至50±4.24（P<0.01）和60.5±9.19（P<0.05），48 h后分别由255±8.49降至69.5±4.95（P<0.01）和86±8.49（P<0.01）；划痕实验进一步证实，敲除ERas基因后胃癌细胞的迁移能力减弱，MKN-28，BGC-823细胞在24 h，48 h，72 h和96 h划痕修复速度显著降低，其中在48 h最具有统计学意义，转染siRNA30和siRNA32的 MKN-28细胞划痕修复率分别从61.35％±3.54%降至25%±6.25%(P<0.001)和28.89%±3.85%（P<0.001），BGC-823分别从58.13%±3.61%降至19.61%±3.78%（P<0.001)和18%±3.85%（P<0.001）；克隆形成实验证实，敲除ERas基因后胃癌细胞的克隆形成能力减弱，转染siRNA30和siRNA32沉默ERas基因后，MKN-28细胞克隆数分别从413±11.3降至237±12.73（P<0.01）和254±9.90（P<0.01），BGC-823分别从318.5±12.02降至166±9.90（P<0.01）和180±12.73（P<0.01）。上述结果显示，ERas基因具有促进胃癌细胞增殖，迁移，克隆形成的能力。 传统Ras基因在胃癌细胞中均有不同程度的表达，其中Hras和Nras基因在各株胃癌细胞中表达水平无明显差异，而Kras基因则呈差异性表达，在MKN-28，NCL-N87，SGC-7901中表达较高，且在MKN-28，BGC-823，SNU-16和SGC-7901细胞中除检测到543 bp的目的条带外还检测到一条约400 bp的条带，经测序证实为一新发现的Kras基因剪接型，特点为缺失第二外显子，第一、三外显子直接拼接，命名为KrasΔE2。测序分析Ras基因突变热点12，13，61位密码子，除GES-1细胞Kras基因第12位密码子由甘氨酸变为丝氨酸外，7株胃癌细胞中均未检测到传统Ras基因的热点突变。 结论：ERas基因在胃癌细胞中呈活化状态，具有促进胃癌细胞增殖，迁移，克隆形成的能力，与胃癌发生存在一定关系；但该基因的活化并不是通过基因突变导致的；ERas基因有望成为胃癌检测的一个新指标或胃癌治疗的一个新靶点。 传统Ras基因在胃癌细胞中均有不同程度的活化，其中Hras和Nras表达均一，而Kras则呈差异性表达，可能Kras与胃癌的关系更为密切；与在其它肿瘤中不同，胃癌细胞中Ras基因并不是通过热点突变导致自身持续活化而致癌。 Kras基因新剪接型KrasΔE2的发现为更深入的认识Kras基因在胃癌细胞中的致癌机理提供了新的思路；该剪接型在胃癌细胞和组织中较普遍存在，可能与Kras基因导致胃癌发生直接相关；至于新剪接型KrasΔE2与胃癌的发生，发展和预后的关系还需进一步的研究。