研究背景目前,恶性肿瘤即癌症已经成为全世界范围内病发以及死亡的主要缘由,直到2015年左右,寰球整个范围内新增癌症人数1410万,据估计以后的20年新增加的病人数将提高70%。因为年纪的增长、不良生活习惯、环境的变化以及传统的方法治疗癌症效果差等因素,我国已成为癌症大国^[1]。据全国肿瘤登记中心统计显示,在2012年的统计报道中,癌症便使得820万人死亡,而肺癌就占了20%,占所有癌症死亡率最高,在2014年的中国,癌症病人提高了429万例,而死亡的病人数目则达到了惊人的281万例,在所有癌症发病与死亡中,肺癌居于首位,而非小细胞肺癌又是最为常见的病种,诊断患有肺癌时,大多数患者已进展到晚期,且生存不超过5年^[1]。迄今为止都没有很好的办法能够医治非小细胞肺癌,癌细胞的恶性增殖以及癌症灶的转移,是临床治疗带来了极大的难题,并且预后较差,死亡率高。肿瘤微环境日益受到关注,已有学者报导称癌细胞间隙中存在大量的细胞趋化因子,而且使得细胞外液的间质细胞与癌细胞的相互作用,发生的免疫炎性反应使得癌细胞的侵袭能力加强。近年来很多研究人员发现,趋化因子受体CCR5可与趋化因子CCL5相接连,并增进癌细胞的侵袭转移^[2,3],虽然也有一些报道CCL/CCR与肿瘤细胞的凋亡相关^[4],并且CCL与细胞内重要抑癌基因P53信号通路有着联系^[5],然而抑制CCR5受体能否促进肿瘤细胞的凋亡,尚未见明确报道。因而探讨CCR5受体抑制剂与非小细胞肺癌细胞凋亡的联系,能为临床治疗肺癌提供新依据奠定良好的基础。研究目的钻研CCR5受体抑制剂致使A549凋亡的机制,为非小细胞肺癌的防治提供新的研讨思绪,为开发新型的针对性强的抗肿瘤药物提供理论依据。实验方法1.运用尼非韦罗,在相同的浓度和时间下,作用于非小细胞肺腺癌细胞A549、非小细胞肺鳞癌细胞H520、正常肺支气管上皮样细胞HBE、乳腺癌细胞MCF-7、肝癌细胞HePG2,并经由MTT法检测该上述细胞的增殖抑制率。2.依然利用尼非韦罗,在相同的浓度和时间下,作用于该上述品种的细胞,并经由流式细胞技术,检测上述不同种类细胞的凋亡率。3.利用流式细胞仪,检测上述不同种类的表面CCR5受体的表达量。4.运用Western Blotting,探讨尼非韦罗致A549细胞凋亡的机制。结果1.在尼非韦罗作用后,运用MTT法,检测出随着尼非韦罗的浓度以及作用时间的延长,A549与MCF细胞受到较大的增长抑制,HBE与HePG2细胞抑制率相对较低,而H520细胞几乎不受影响。2.在尼非韦罗作用后,运用流式细胞技术,检测该上述品种的细胞的凋亡率,其中A549最高,MCF细胞次之,HBE与HePG2细胞凋亡率较低,H520细胞几乎未见细胞凋亡。3.使用流式细胞仪,检测可知细胞膜表面的CCR5受体表达量由高到低的顺序为A549细胞、MCF细胞、HePG2细胞、HBE细胞、H520细胞。4.在尼非韦罗作用后,利用蛋白质的曝光显影方法,检测出PI3K/Akt信息传导通路受到抑制,重要的能量蛋白Akt活性降低,雷帕霉素受体（m TOR）表达量下降,抑癌基因蛋白P53含量上升,周期蛋白Cyclin D1含量降低等。结论1.流式细胞术检测A549细胞表面CCR5受体表达量最高,尼非韦罗作用之后的A549细胞凋亡率最高,间接表明细胞的凋亡率与CCR5表达量相关。2.尼非韦罗可使得A549当中P53蛋白表达量的上升,有助于癌细胞的凋亡。3.在尼非韦罗作用后,A549细胞内重要的信号传导通路PI3K/Akt受到阻滞,细胞各项生理功能被抑制,引起细胞的凋亡。