β2受体介导巨噬细胞的分化对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响及意义的研究

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目的:  探讨经β2受体介导,影响脂多糖及干扰素γ(LPS+IFN-γ)或白介素4(IL-4)诱导THP-1源巨噬细胞向M1型或M2型的分化及意义。  方法:  以LPS+IFN-γ刺激THP-1源巨噬细胞向M1型极化,以IL-4刺激THP-1源巨噬细胞向M2型极化;其间分别以不同浓度的β2受体激动剂和对β2受体具不同选择性多种β受体阻滞剂干预,采用经典方法分别进行M1、M2型细胞鉴定:用酶联免疫法(ELISA)检测不同诱导状态下THP-1源巨噬细胞的TNF-α和IL-10的分泌量。荧光定量PCR检测与巨噬细胞相关的精氨酸酶-1(Arg-1)、一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA的表达水平,流式细胞技术检测细胞表面分子CD80、CD206的表达水平。同时以流式细胞技术检测以不同浓度的β2受体激动剂与对β2受体具不同选择性多种β受体阻滞剂干预并吞噬了OX-LDL24小时后,各组凋亡细胞数和存活细胞数。  结果:  1.β2受体激动剂沙丁胺醇抑制TNF-α的分泌,抑制iNOS mRNA和CD80的表达,同时促进IL-10的分泌,增加Arg-1 mRNA和CD206的表达;选择性β1受体阻滞剂美托洛尔,非选择性β受体阻滞剂普萘洛尔,高选择性β2受体阻滞剂ICI118551则均可促进TNF-α的分泌,促进iNOS mRNA和CD80的表达,同时抑制IL-10的分泌,减少Arg-1 mRNA和CD206的表达。  2.β2受体激动剂沙丁胺醇随浓度增高,凋亡率和坏死率增加,细胞存活率降低。与OX-LDL组相比,沙丁胺醇低、中浓度组细胞存活率比OX-LDL组高,但差异无显著性,高浓度组细胞存活率比OX-LDL组低,差异有显著性。对β2受体具不同选择性的β受体阻滞剂美托洛尔组、普萘洛尔组和ICI118551组则是随浓度增高,细胞凋亡率和坏死率呈降低趋势,细胞存活率呈增加趋势,组间有显著性差异,与OX-LDL组相比,低、中浓度组细胞存活率有显著性差异,但高浓度组细胞存活率则无显著性差异。  结论:  1.β2受体激动剂沙丁胺醇能够抑制LPS+IFN-γ诱导THP-1细胞向M1型分化,促进IL-4诱导THP-1细胞向M2型分化。美托洛尔组、普萘洛尔组和ICI118551组能够促进LPS+IFN-γ诱导THP-1细胞的向M1型分化,抑制IL-4诱导THP-1细胞向M2型分化。  2.β2受体激动剂沙丁胺醇随着浓度增加,促进细胞凋亡和坏死,降低细胞存活率。对β2受体具不同选择性的β受体阻滞剂美托洛尔、普萘洛尔和ICI118551则随浓度增高降低细胞凋亡率和坏死率,细胞存活率达最高,细胞保护作用达最强。
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