论文部分内容阅读
本文利用多糖衍生物手性固定相,在反相模式下对三种在柑橘中广泛使用的代表性手性农药（马拉硫磷,氰戊菊酯,丙溴磷）进行了手性拆分研究;评价了不同固定相类别、流动相组成及温度对手性分离的影响,探讨了手性识别机理。针对丙溴磷在柑橘中降解缓慢、残留检出率高等问题,本文从手性对映体水平建立了丙溴磷在柑橘中残留分析方法,开展了丙溴磷对映体在柑橘中的立体选择性降解差异研究。本文首次报道了在反相模式下利用直链淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）手性固定相进行的丙溴磷对映体拆分及其在柑橘中选择性降解行为研究,为系统开展丙溴磷在柑橘上安全评价研究提供了数据支持。主要研究结果如下:（1）建立了以多糖衍生物为手性固定相的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）直接拆分马拉硫磷对映体的方法。在反相模式下,考察了手性固定相种类,流动相组成,柱温对马拉硫磷2个立体异构体分离的影响;同时,利用热力学方法对马拉硫磷的立体异构体与固定相之间的色谱保留和分离的热力学机理进行了探讨。结果表明:使用MJ（2）-RH柱（纤维素-三（4-甲基苯甲酸酯））,在流动相为甲醇-水=70/30,流速0.2 m L/min,柱温30℃的条件下,可实现马拉硫磷2个立体异构体的基线分离;在实验温度范围内（20-40℃）,马拉硫磷立体异构体的手性拆分过程主要受焓驱动,降低温度有利于分离。（2）建立了以多糖衍生物为手性固定相的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）直接拆分氰戊菊酯对映体的方法。在反相液相色谱条件下,考察了手性固定相的种类、流动相组成、柱温、流速对氰戊菊酯4个立体异构体分离的影响。同时,利用热力学方法对氰戊菊酯的立体异构体与固定相之间的色谱保留和分离的热力学机理进行了探讨。结果表明:采用Lux Cellulose-3手性色谱柱,在流动相为乙腈-水（5 m M甲酸铵）=55/45,流速0.4 m L/min,柱温30℃的条件下,可在14 min内实现氰戊菊酯4个立体异构体的基线分离;在实验温度范围内（10-38℃）,（+）-Distereomer A与（+）-Distereomer B以及（-）-Distereomer B与（-）-Distereomer A的手性拆分过程主要受熵驱动,升高温度有利于分离;（+）-Distereomer B与（-）-Distereomer B的手性拆分过程主要受焓驱动,降低温度有利于分离。上述研究结果进一步拓展了HPLC-MS/MS在菊酯类手性农药对映体分离及检测上的应用。（3）建立了以多糖衍生物为手性固定相的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）直接拆分丙溴磷对映体的方法。在反相液相色谱条件下,优化了固定相种类,流动相组成、柱温对于丙溴磷2个立体异构体拆分的影响。同时,利用热力学方法对丙溴磷的立体异构体与固定相之间的色谱保留和分离的热力学机理进行了探讨。结果表明:使用ND（2）-RH（直链淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯））手性色谱柱,在流动相为甲醇/水=70/30,温度35℃,流速0.2 m L/min的条件下,可在25 min内实现丙溴磷2个立体异构体的基线分离。在实验温度范围内（20-40℃）,丙溴磷立体异构体的手性拆分过程主要受熵驱动,升高温度有利于分离。（4）建立了QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法测定柑橘全果中的丙溴磷对映体的分析方法。柑橘样品经过垂直振荡提取（乙腈）,多壁碳纳米管净化（内径规格为10-20 nm）。丙溴磷对映体经ND（2）-RH手性色谱柱分离,以甲醇-水=70/30为流动相进行等度洗脱,采用正离子多反应监测模式（MRM）,基质匹配标准曲线法定量。结果表明:丙溴磷对映体在2.5-250μg/L质量浓度范围内线性关系良好（r≥0.9996）,方法定量下限（LOQ）为5μg/kg。在3个不同加标水平下（单体浓度为5、100、500μg/kg）,丙溴磷2个对映体在柑橘全果中的平均回收率为76.14%-82.75%,相对标准偏差（RSD）在3.21%-5.95%。所建方法简单、灵敏度高、重复性好,基质效应较小,适用于柑橘中丙溴磷对映体的定量检测。（5）在四川、重庆两地开展了一年温州蜜柑（宫川）田间实验,动态实验结果表明丙溴磷对映体在柑橘中的降解符合一级动力学方程,（+）-丙溴磷的降解半衰期12.83-14.14 d,（-）-丙溴磷的降解半衰期为14.14-16.11 d。通过比较对映体分数（EF值）,结果发现在田间试验过程中其EF值均小于0.50;重庆柑橘田间试验中丙溴磷对映体EF值在施药后30 d最低,为0.43;四川柑橘田间试验中丙溴磷对映体EF值在施药后40 d最低,为0.44。综合表明其在柑橘中存在明显的选择性降解,其对映体降解速率为（+）-丙溴磷>（-）-丙溴磷,（-）-丙溴磷易在柑橘中富集。