【摘 要】
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目的研究大鼠坐骨神经损伤后近、远侧断端组织中微小RNA-221与PTEN的表达情况,及其与周围神经损伤修复的相关性,以期为临床诊断治疗周围神经损伤提供新靶点。方法取SPF级雄性SD大鼠96只建立坐骨神经损伤模型,分别于术后0天(对照组,0d)及术后1、4、7天(实验组,1d、4d、7d)处死24只大鼠,无菌条件下取坐骨神经近、远侧断端组织。通过坐骨神经功能指数评分神经功能;实时荧光定量PCR检测m
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目的研究大鼠坐骨神经损伤后近、远侧断端组织中微小RNA-221与PTEN的表达情况,及其与周围神经损伤修复的相关性,以期为临床诊断治疗周围神经损伤提供新靶点。方法取SPF级雄性SD大鼠96只建立坐骨神经损伤模型,分别于术后0天(对照组,0d)及术后1、4、7天(实验组,1d、4d、7d)处死24只大鼠,无菌条件下取坐骨神经近、远侧断端组织。通过坐骨神经功能指数评分神经功能;实时荧光定量PCR检测miR-221表达,Western blot检测PTEN蛋白表达;通过HE染色及免疫荧光染色对坐骨神经断端组织进行病理学分析;染色采用双荧光素酶报告基因验证miR-221与PTEN二者的调控关系;同时结合透射电镜观察神经组织超微结构。结果实时荧光定量PCR和Western blot检测示,随术后时间延长,大鼠坐骨神经近、远侧断端组织中miR-221相对表达量均逐渐增加,PTEN蛋白相对表达量均逐渐减少。各实验组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);且各实验组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。各实验组神经组织近侧断端对比其同组远侧断端,其miR-221相对表达量均高于远侧断端,PTEN蛋白相对表达量均低于远侧断端,同组近、远断端之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。而坐骨神经功能指数评分示,各实验组与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告基因示PTEN为miR-221作用靶点。HE染色及免疫荧光染色观察示各实验组与对照组比较存在明显病理学改变。透射电镜观察示对照组为正常形态结构;各实验组随时间增加,雪旺细胞增殖及轴突、髓鞘溃变逐渐增加。近、远侧断端相比较,1d组无明显差异,4d组和7d组近侧断端较远侧断端的雪旺细胞增殖较多,轴突、髓鞘溃变程度较少。结论大鼠坐骨神经损伤后,存在miR-221的表达上调靶向调控PTEN表达降低,进而产生近、远侧断端miR-221及PTEN表达含量的差异,这一现象可能对促进周围神经损伤后修复发挥着一定作用。
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