【摘 要】
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目的:探讨塞来昔布(Celecoxib)对体外培养的人恶性胶质瘤细胞(U251)的增殖影响,以及塞来昔布不同浓度对核因子(NF-κB)在细胞内表达的分布的影响,进一步探讨其可能的作用机制
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目的:探讨塞来昔布(Celecoxib)对体外培养的人恶性胶质瘤细胞(U251)的增殖影响,以及塞来昔布不同浓度对核因子(NF-κB)在细胞内表达的分布的影响,进一步探讨其可能的作用机制方法:人胶质瘤细胞(U251)分别在用药组(分别以含Cele浓度0、10、25、50、100 umol/l的培养液作用)和联合用药组(用药组中加入了肿廇坏死因子TNF-α50ng/ml)中体外培养24h。应用甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖的影响,用MaxVisionTM免疫细胞化学法观察NF-κB(p65)蛋白在塞来昔布和TNF-α对细胞刺激后在U251细胞的亚细胞分布,用western blot检测细胞核内NF-κ(Bp65)蛋白在细胞核内的表达。结果:甲基噻唑蓝(MTT)法结果显示,不同浓度的塞来昔布(Celecoxib)对细胞生长均有一定的抑制作用,且Celecoxib对细胞的抑制作用呈剂量依赖性,而与TNF-α的联合作用并没有协同效应(P>0.05)。免疫细胞化学示:静息状态下的U251细胞内的NF-κB(p65)蛋白核内外都有分布.而用50ng/ml TNF-α刺激U251细胞30分后,细胞内的p65蛋白明显从细胞浆向细胞核转移。而用塞来昔布预处理1h后联合TNF-α作用于U251细胞,可以明显的抑制NF-κB(p65)的细胞核移位。并且不同浓度的塞来昔布作用细胞,通过western blot检测其p65蛋白在核内的表达量,也随着塞来昔布的浓度增加而核内表达量随之减少,并且量小于未处理组。结论:1.塞来昔布可以有效抑制U251细胞增殖,其作用强度呈剂量依赖性。2.塞来昔布可以有效阻止TNF-α诱导的NF-κB激活,阻止NF-κB(p65)的细胞核内移位3.塞来昔布抑制U251细胞增殖的机制可能,与其抑制NF-κB(p65)的细胞核移位有关
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