基于循环酶切信号放大和无模板DNA延伸反应的电化学生物传感器检测microRNA-196a

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MicroRNA-196a是胰腺癌的生物标志物,对胰腺癌具有重要的诊断意义。电化学传感器具有反应灵敏、成本低和样品消耗少等优点,在microRNAs检测中备受关注。本文提出了一种简单灵敏的电化学生物传感器用于检测 microRNA-196a。这种电化学生物传感器是基于循环酶切信号放大和无模板 DNA延伸反应构建而成。当 microRNA-196a存在时,双链特异性核酸酶催化3’末端标记了 PO4的捕获探针水解,使靶miRNA循环利用。同时暴露出捕获探针的3’-OH,通过末端脱氧核苷酸转移酶触发DNA延伸反应,产生大量的单链DNA。单链DNA结合亚甲基蓝后,输出电化学信号。基于这种双重放大机制,所构建的生物传感器可以在0.05 fM至50 pM浓度范围内实现对的microRNA-196a的高灵敏检测,检测限低至15 aM。该生物传感器特异性高,可以区分出单个碱基错配的miRNA和靶 miRNA。并且显示出良好的重复性和稳定性。该方法成功应用于血浆样品中microRNA-196a的测定,因此在胰腺癌的临床诊断中具有很好的应用前景。
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