论文部分内容阅读
目的：
1．通过研究正常人和鼻咽癌患者的糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)的酶活性和酶促反应的3-D图，探索鼻咽癌患者该酶活性的变化情况及该酶促反应的可能机制。
2．通过研究正常人和鼻咽癌患者GPI-PLD mRNA的表达水平，探寻鼻咽癌患者该酶活性变化的可能机制，为鼻咽癌的诊断、预后提供有效指标。
方法：
1．采用我室自制的具完整GPI结构的胎盘型碱性磷酸酶(PLAP)作底物进行酶促反应，测定正常人和鼻咽癌患者GPI-PLD的酶活性并应用韩国新科有限公司生产的光电二极管紫外—可见光谱仪仪器研究了该酶的催化机理，并且利用该机所带软件作出3-D图。
2．采用逆转录PCR (RT-PCR)检测正常人和鼻咽癌患者的GPI-PLD mRNA的表达水平，以RT-PCR结果的琼脂糖电泳照片的积分光密度值(IA)比值代表GPI-PLD mRNA的表达水平。
结果：
1．正常人和鼻咽癌患者血清GPI-PLD的活性水平(均以转化底物百分比表示)分别为17.6％士2.7％和20.6％士2.4％，鼻咽癌患者的血清GPI-PLD活性比正常人血清GPI-PLD活性显著增高(P<0.05)。并且其酶促反应的3-D图显示有直观差异。
2．RT-PCR检测GPI-PLD mRNA的表达，结果表明正常人鼻咽上皮细胞中GPI-PLD mRNA琼脂糖电泳照片的平均积分光密度比值(IA比值)是2.5259±0.5618，鼻咽癌患者鼻咽上皮细胞中GPI-PLDmRNA琼脂糖电泳照片的平均积分光密度比值(IA比值)是9.3522±5.2879，鼻咽癌患者的GPI-PLD mRNA的表达水平比正常人鼻咽上皮细胞中GPI-PLD mRNA的表达水平显著性增高(P<0.05)。结论：
1．鼻咽癌患者的血清GPI-PLD活性比正常人显著增高，其酶促反应的3．D图也与正常人有明显差异，提示测定GPI-PLD活性可作为临床诊断鼻咽癌的生化指标。
2．鼻咽癌患者GPI-PLD mRNA的表达水平高于正常人。GPI-PLDmRNA表达增强是导致鼻咽癌患者GPI-PLD酶活性增高的主要机制。