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目的：从肉眼大体表面形态观察和扫描电子显微镜观察，细菌培养及鉴定，内毒素含量定性和定量测定三大方面认识血液透析水处理系统PVC管道内表面生物膜。同时测定中南大学湘雅二医院新、旧血液透析水处理系统反渗水和透析液的内毒素含量。
方法：选择血液透析水处理系统PVC管道中有代表性的点，软水器后点，活性炭罐后点，反渗机前点，反渗机后点，动力泵出口点，死腔1点，死腔2点，共7处位置进行研究。取反渗机前点、反渗机后点管样进行管道内表面肉眼大体表面形态观察和扫描电子显微镜观察。取反渗机前点、反渗机后点管样，将内表面生物膜制成溶液，在23摄氏度，37摄氏度条件下进行血琼脂培养基中细菌培养菌落计数及种类鉴定。将所有管样内表面生物膜制成溶液，进行内毒素定性及定量测定。取旧血液透析水处理系统反渗水、透析液，新血液透析水处理系统反渗水、透析液，进行内毒素含量定性及定量测定。
结果：
1.旧血液透析水处理系统反渗机前点，反渗机后点PVC管道内表面生物膜形态学观察
(1)肉眼表面大体形态观察结果
反渗机前点管道内表面呈棕褐色，有活性炭粉末沉积，均匀分布；反渗机后点管道内表面颜色无特殊改变，也无明显杂质附着痕迹。
(2)扫描电子显微镜观察结果
反渗机前点的水处理系统PVC管道中存在细菌生物膜,主要由成簇状生长的杆菌、球形细菌和活性炭粉末混杂而成,也可见到细菌细胞外基质脱水后形成的特殊纤维网状结构,膜面连续,呈多层结构。反渗机后点的水处理系统PVC管道中生物膜形态与反渗机前点相比,也存在形状大小相同的细菌,但数量极少,结构松散。
2.旧血液透析水处理系统反渗机前点,反渗机后点PVC管道内表面生物膜细菌培养及鉴定
(1)血琼脂培养基37℃培养结果
反渗机前点1号标本菌落计数为600CFU/ml,染色为革兰氏阳性杆菌,种类为枯草杆菌;反渗机前点2号标本菌落计数为300CFU/ml,染色为革兰氏阳性球菌,种类为微球菌;反渗机前点3号标本菌落计数为1200CFU/ml,染色有革兰氏阳性杆菌,种类为枯草杆菌,有革兰氏阴性杆菌,种类为莫拉氏菌属;反渗机后点4号、5号标本培养结果为阴性;反渗机后点6号标本菌落计数为100 CFU/ml,染色为革兰氏阳性球菌,为微球菌。
(2)血琼脂培养基23℃培养结果
反渗机前点1号标本菌落计数为4000CFU/ml,染色为革兰氏阴性杆菌,种类为皮氏伯克霍尔德菌和腐败假单胞菌;反渗机前点2号标本菌落计数为2500CFU/ml,染色为革兰氏阳性球菌,种类为微球菌;反渗机前点3号标本菌落计数为1500CFU/ml,染色为革兰氏阴性杆菌,种类为枯草杆菌;反渗机后点4号标本、5号标本、6号标本培养结果均阴性。
3.旧血液透析水处理系统PVC管道样本内表面生物膜内毒素含量的测定
(1)定性测定结果
测得软水器后点，活性炭罐后点，反渗机前点，反渗机后点，动力泵出口点，死腔1点，死腔2点管道样本内表面生物膜含量均大致在2.0～4.OEU／ml区间。
(2)定量测定结果
测得各样本内毒素含量为软水器后点2.821±0.807EU／ml，活性炭罐后点3.635±0.427EU／ml，反渗机前点3.687±0.271EU／ml，反渗机后点2.041±0.295EU／ml，动力泵出口点1.983±0.390EU／ml，死腔1点2.373±0.535EU／ml，死腔2点2.858±0.690EU／ml，空白对照(无菌生理盐水)0.212±0.013EU／ml。
反渗机上游各点与反渗机下游各点管道内表面生物膜浓度相比，软水器后点高于反渗机后点，有统计学意义，P<0.05；软水器后点高于动力泵出口点，有统计学意义，P<0.05；活性炭罐后点高于反渗机后点，有统计学意义，P<0.01；活性炭罐后点高于动力泵出口点，有统计学意义，P<0.01；活性炭罐后点高于死腔1点，有统计学意义，P<0.01；活性炭罐后点高于死腔2点，有统计学意义，P<0.05；反渗机前点高于反渗机后点，有统计学意义，P<0.01；反渗机前点高于动力泵出口点，有统计学意义，P<0.01；反渗机前点高于死腔1点，有统计学意义，P<0.01：反渗机前点高于死腔2点，有统计学意义，P<0.05。
反渗机上游各点管道内表面内毒素含量之间互相比较，活性炭罐后点高于软水器后点，有统计学意义，P<0.05；反渗机前点高于软水器后点，有统计学意义，P<0.05。
反渗机下游各点管道内表面内毒素含量之间互相比较，反渗机后点低于死腔2点，有统计学意义，P<0.05；动力泵出口点低于死腔2点，有统计学意义，P<0.05。
4．新旧血液透析水处理系统反渗水和透析液的内毒素含量测定
(1)定性测定结果
新血液透析水处理系统反渗水和透析液内毒素含量均小于0.25 HU／ml，旧血液透析水处理系统反渗水内毒素含量小于0.25 EU／ml，旧血液透析水处理系统透析液内毒素含量小于0.5 HU／ml，大于0.25 HU／ml。
(2)定量测定结果
各样本内毒素含量为新血液透析水处理系统反渗水0．015±0.108 EU／ml；新血液透析水处理系统透析液0.093±0.035 EU／ml；旧血液透析水处理系统反渗水0.134±0.041EU／ml；旧血液透析水处理系统透析液0.483±0.081 EU／ml；
结论：
1．血液透析水处理系统反渗机前后PVC管道内表面存在生物膜。
2．血液透析水处理系统PVC管道内表面生物膜溶液细菌培养，反渗机前点以革兰氏阴性杆菌为主；反渗机后点仅培养出革兰氏阳性球菌微球菌。
3．从活性炭罐后点到反渗机前点均为生物膜内毒素含量最高的部分。反渗机前点与反渗机后点PVC管道内表面内毒素含量差别为血液透析水处理系统相邻结构中差异最大者。
4．中南大学湘雅二医院新血液透析水处理系统采用新的设备及热消毒方法后，透析用水内毒素含量极微。