目的 观察双乌宣痹颗粒含药血清对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响,探讨双乌宣痹颗粒治疗类风湿关节炎的作用机制。方法 胶原酶消化法分离RA患者膝关节FLS,传代培养并鉴定后,取4～7代细胞用于实验。RA-FLS分别用高[17.28g/(kg·d)]、中[8.64 g/(kg·d)]、低[4.32 g/(kg·d)]剂量双乌宣痹颗粒含药血清培养24h,即高、中、低剂量双乌宣痹组;另设阳性药物对照[来氟米特,1.04mg/(kg·d)]组和阴性对照(生理盐水)组。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blotting检测PI3K、Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关的X蛋白(Bax)的表达水平。结果 高、中、低剂量双乌宣痹含药血清以及来氟米特含药血清均能明显促进FLS的凋亡,下调PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白表达,与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);与来氟米特组比较,高、中双乌宣痹组能明显下调PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 双乌宣痹含药血清能促进RA-FLS凋亡,下调Bcl-2、PI3K、p-Akt蛋白的表达,这可能是其治疗RA的机制之一。