球虫病每年给养鸡业带来约 20 亿美元的经济损失，基于药物的球虫病控制策略受到耐药性和药物残留两大问题的困扰，因此，开发新型药物和疫苗是球虫学界研究的热点。实现外源基因在柔嫩艾美耳球虫的转染是进一步研究鸡球虫的生物学特性、其与宿主的相互作用和宿主的抗球虫免疫应答用于开发更加有效的新药物和新疫苗的必然环节。 本实验旨在建立一个瞬间转染体系，观察增强型黄色荧光蛋白(enhanced yellow fluorescentprotein，eyfp) 在柔嫩艾美耳球虫子孢子体内是否表达。用DEAE-52纤维素柱层析收集子孢子，电击转染方法将源于柔嫩艾美耳球虫自身调控序列构建的载体pH4-2EYFP-Actin3’导入到子孢子的体内，并将转染的子孢子接种到MDBK细胞上进行体外培养。荧光显微镜下观察到黄色荧光蛋白能够在子孢子的体内瞬时表达，并且表达黄色荧光蛋白的子孢子能够侵入MDBK细胞，发育到第一代裂殖体并释放出裂殖子，此过程黄色荧光蛋白一直持续地表达。这表明柔嫩艾美耳球虫的自身调控序列能够启动外源基因在其体内进行瞬时表达，为下一步进行柔嫩艾美耳球虫的稳定转染提供了实验基础。