肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶同工酶检测方法的建立及临床应用

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针对原发性肝癌(PHC)的诊断目前存在的漏诊问题,基于肝癌所特有的谷氨酰转移酶同工酶GGT-Ⅱ分子形式具有早期性和敏感性的特点,建立了一种新的诊断指标即GGT-Ⅱ同工酶检测新方法、并对此项指标临床诊断意义做了相关评价。所建立的GGT-Ⅱ同工酶检测新方法是采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板梯度电泳,凝胶有四种浓度,自下而上依次为15%,11.2%,7.5%,6.9%。在样本孔里加入待检血清后,先在10mA的电流下电泳约1 h。待样本进入分离胶后,加大电流至20mA电泳2 h。电泳结束后取出凝胶,将两张醋酸纤维素膜放在含有r-谷氨酰对硝基苯胺和N-萘乙烯二胺的基质溶液中浸湿,以夹心法包埋凝胶放置37℃保温1 h。取出后加显色剂显色,数秒后可见红色的GGT酶区带或见肝癌特异性GGT区带(Ⅰ’、Ⅱ、Ⅱ’)。在临床应用方面:对756例样本进行检测,其中包括正常人200例,孕妇34例,原发性肝癌187例,各种肝炎66例,肝硬化120例,肝外肿瘤80例。结果表明,GGT-Ⅱ的诊断敏感性达到94.1%和诊断特异性达到96.13%;即使在AFP<400μg/L的病例中,其诊断敏感性也可达78.57%。本研究确定了GGT-Ⅱ对于PHC是一项很好的诊断指标,同时也弥补了AFP的不足。可用于肝癌病人、长期肝炎病患者,如肝硬化及一些腹水标本是一项很好的监测指标。
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