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第一部分鞘内和侧脑室注射异氟烷对小鼠痛觉的影响
目的:比较鞘内注射和侧脑室注射异氟烷对小鼠的镇痛作用,从整体水平探讨异氟烷的镇痛作用部位。
方法:用热板法,福尔马林法观察、比较鞘内注射(i.t.)和侧脑室注射(i.c.v.)异氟烷对小鼠热板法痛阈(HPPT)热板疼痛指数(HPPI= HPPT/basal HPPT)及抖足时间和抬足次数的影响。用免疫组化方法观察鞘内注射异氟烷对福尔马林小鼠脊髓Fos蛋白表达的影响。
结果:热板实验中,与人工脑脊液组相比,异氟烷0.02、0.04、0.08ml·kg-1能够剂量依赖性地引起HPPT/HPPI增高(P<0.01或P<0.05):以上剂量的异氟烷i.c.v.对HPPT,HPPI均无明显影响(P>0.05)。福尔马林法实验中,异氟烷0.01、0.02、0.04ml·kg-1i.t.能剂量依赖性地减少抖足时间和抬足次数(P<0.01或P<0.05);相同剂量的异氟烷i.c.v.对抖足时间和抬足次数均无明显影响(P>0.05)。鞘内注射异氟烷组的Fos阳性神经元数量少于鞘内注射人工脑脊液组,鞘内注射异氟烷可抑制福尔马林小鼠脊髓Fos表达(P<0.01)。
结论:在正常小鼠整体水平,异氟烷镇痛部位主要在脊髓,脑可能不是主要镇痛部位。
第二部分鞘内或侧脑室注射辣椒素对异氟烷镇痛、催眠作用的影响
目的:探讨TRPV1受体与异氟烷催眠、镇痛作用的关系。
方法:镇痛实验热板法中,小鼠分为腹腔注射(ip)异氟烷0.3ml·kg-1镇痛和生理盐水两大组,每大组再分为鞘内注射(i.t.)溶媒(1%酒精和1%Tween20稀释),辣椒素(capsaicin)125、250和500ng·kg-1四个小组,检测热板法痛阈,热板疼痛指数(HPPI);镇痛实验扭体法中小鼠分为皮下注射(sc)异氟烷0.5ml·kg-1镇痛和生理盐水两大组,每大组再分为鞘内注射溶媒或辣椒素125、250和500ng·kg-1四个小组,检测扭体次数(Writhing Number)。催醒实验中,小鼠异氟烷ip1.0ml·kg-1催眠后,侧脑室注射(i.c.v.)溶媒或辣椒素125、250和500ng·kg-1,容积为5μl,观察给药后小鼠的睡眠时间。
结果:与溶媒组比较,鞘内注射辣椒素(125、250和500ng·kg-1)能够减少异氟烷镇痛小鼠的HPPT,HPPI(P<0.05)和拮抗异氟烷镇痛小鼠扭体次数的减少(P<0.05)。小鼠异氟烷催眠后,与溶媒组相比,辣椒素125,250和500ng·kg-1,对小鼠睡眠时间无明显影响(P>0.05)。
结论:TRPV1可能是异氟烷抗热刺激痛和内脏化学刺激痛的靶位之一,但可能不是异氟烷催眠作用的主要靶位。