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近年来,由于化学农药对环境和人类身体健康的危害日益为人们所认识,生物防治受到越来越多的关注。真菌生物农药作为一种重要的线虫控制手段,在植物病原线虫生物防治中已经获得广泛研究和应用,但是一直存在制剂成本高、货架期短的问题。本研究以洛斯里被毛孢(Hirsutella rossiliensis)为材料,利用其液体发酵菌丝体为活性成分成功研发出洛斯罩被毛孢微球制剂,并筛选获得其最佳制备体系;继而应用这一技术体系研发了淡紫拟青霉(Paecilomyce lilacinus)和厚孢普契尼亚霉(Pochonia chlamydosporia)微球制剂,系统评价了温度、水活度、气体对微球制剂活力的影响;在此基础上,就微球制剂对根结线虫的防治效果进行了温室盆栽实验评价,以期推动我国真菌生物农药的研究与开发。
I.洛斯里被毛孢微球制剂的制备
以洛斯罩被毛孢OWVT-1液体发酵菌丝为活性成分、矿土为载体、海藻酸钠和氯化钙为粘结剂,采用微球法成功制备出防治土壤中植物病原线虫的新型生防菌丝颗粒制剂一微球制剂。通过PDA平板测定法,筛选获得最佳载体为10%硅藻土,最佳粘结剂配比为2%海藻酸钠、0.2M氯化钙。货架期影响因子研究表明,温度和水活度对该微球制剂活力具有显著的影响,低温(4℃或-20℃)、低水活度(0.12aw)能够有效延长微球制剂货架期。
II.储藏条件对淡紫拟青霉YES-2和厚孢普契尼亚霉HD2-9微球制剂存活的影响
在6个月储藏期内采用CFU法,对以10%硅藻土为载体、2%海藻酸钠与0.2M氯化钙为粘结剂的2种重要线虫生防真菌淡紫拟青霉(P. lilacinus)YES-2和厚孢普契尼亚霉(P.chlamydosporia)HD2-9微球制剂,开展了不同温度(40、25、4、-20℃)、水活度(0.12、0.33、0.53、0.75aw)、气体(氮气、二氧化碳、真空、自然空气)对货架期影响的研究。结果表明,在低温(4℃或-20℃)、低水活度(<0.33)储藏条件下,两种微球制剂的货架期都得到了明显延长。气体包装实验表明真空对淡紫拟青霉YES-2活力没有显著影响,而对厚孢普契尼亚霉HD2-9活力有利;二氧化碳不利于淡紫拟青霉YES-2制剂活力保持,而对厚孢普契尼亚霉HD2-9活力有利;氮气对延长两种生防真菌制剂货架期都有促进作用。以上结果为提高生防真菌制剂货架期提供了理论指导。
III.微球制剂对南方根结线虫室内防治效果试验
通过温室盆栽试验,研究了淡紫拟青霉和厚孢普契尼亚霉2种线虫生防真菌微球制剂对南方根结线虫的防治效果。结果表明,随微球制剂用量加大,植株根结指数明显降低,卵囊数量显著下降,种群数量降低。当淡紫拟青霉微球制剂用量为1.6%时,植株根结指数最低,根上卵囊数目最少,防治效果达到67%。由此可知微球制剂适合土壤环境使用,能够有效控制根结线虫的危害。