背景和目的组织学是研究有机体微细结构及其与功能关系的一门形态科学,是一门实验性很强的学科。结缔组织是人和高等动物的基本组织之一,疏松结缔组织又称蜂窝组织,是结缔组织中最有代表性的一种,广泛分布在器官、组织和细胞之间,对器官组织起连接、支持、防御、营养、保护和创伤修复等功能。疏松结缔组织内主要结构有成纤维细胞、巨噬细胞、肥大细胞、浆细胞、脂肪细胞、未分化的间充质细胞、白细胞等细胞,胶原纤维、弹性纤维、网状纤维三种纤维,疏松结缔组织铺片的显微结构观察是组织学实验教学中非常重要的一部分内容,但要在一张铺片内充分显示以上结构非常困难。为了能够在一张铺片中同时观察到更多种类、特点更加鲜明的纤维和细胞,本研究通过分析对比不同动物、不同部位取材及不同染色方法制作疏松结缔组织铺片的结果差异,以获得最佳的疏松结缔组织铺片制作方法。研究方法Wistar大鼠经腹腔注射10g/L苔盼蓝生理盐水溶液2.5ml,C57小鼠经腹腔注射10g/L苔盼蓝生理盐水溶液0.3ml,1次/d,连续3d,于第4d分别在皮下、肠系膜取疏松结缔组织制作铺片,对两个不同部位取材制作的铺片分别进行HE染色、醛复红-亮绿-橘黄G染色,烤干、封片、拍照。研究结果1.Wistar大鼠经皮下取材制备的疏松结缔组织铺片通过HE染色可见成纤维细胞、巨噬细胞、肥大细胞的细胞核、弹性纤维等染成蓝紫色,大量成纤维细胞,肥大细胞清晰,巨噬细胞可见苔盼蓝吞噬颗粒;细胞质、胶原纤维等被染成粉红色,但弹性纤维、胶原纤维着色不清晰。2.C57小鼠经皮下取材制备的疏松结缔组织铺片通过HE染色可见成纤维细胞的细胞核染成蓝紫色、巨噬细胞可见苔盼蓝吞噬颗粒,细胞质、胶原纤维等被染成粉红色,但胶原纤维着色不清晰,弹性纤维成蓝紫色,但显示不清晰,肥大细胞未显示。3.Wistar大鼠经皮下取材制备的疏松结缔组织铺片通过醛复红-亮绿-橘黄G染色可见弹性纤维被染成蓝紫色,粗细不均匀,一端呈现卷曲状,胶原纤维被染成橙黄色,成纤维细胞、巨噬细胞、肥大细胞等未着色。4.C57小鼠经皮下取材制备的疏松结缔组织铺片通过醛复红-亮绿-橘黄G染色可见少量弹性纤维被染成蓝紫色,着色不清晰,胶原纤维被染成橙黄色,粗细不均匀,成纤维细胞、巨噬细胞、肥大细胞等未着色。5.Wistar大鼠经肠系膜取材制备的疏松结缔组织铺片通过HE染色可见成纤维细胞、巨噬细胞、肥大细胞的细胞核、弹性纤维等被染成蓝紫色,可见清晰成纤维细胞、肥大细胞,巨噬细胞可见苔盼蓝吞噬颗粒;细胞质、胶原纤维等染成粉红色,但弹性纤维、胶原纤维着色不清晰。6.C57小鼠经肠系膜取材制备的疏松结缔组织铺片通过HE染色可见成纤维细胞细胞核被染成蓝紫色,巨噬细胞充满蓝色吞噬颗粒,胶原纤维染成粉红色,但着色不清晰。弹性纤维、肥大细胞未显示。7.Wistar大鼠经肠系膜取材制备的疏松结缔组织铺片通过醛复红-亮绿-橘黄G染色可见弹性纤维、肥大细胞被染成紫红色,核圆形呈棕黄色;巨噬细胞清晰可见,形态不规则,胞质中可见粗大清晰的苔盼蓝颗粒,细胞核呈圆形棕黄色;成纤维细胞胞质未着色,核仁呈棕黄色,胶原纤维染成鲜艳的绿色。8.C57小鼠经肠系膜取材制备的疏松结缔组织铺片通过醛复红-亮绿-橘黄G染色可见巨噬细胞充满蓝色吞噬颗粒,弹性纤维、胶原纤维、成纤维细胞、肥大细胞等未显示。研究结论1.肠系膜取材较皮下取材制备的疏松结缔组织铺片效果好;2.大鼠取材较小鼠取材制备的疏松结缔组织铺片效果好;3.大鼠肠系膜取材经醛复红-亮绿-橘黄G染色为制备疏松结缔组织铺片的最佳方法。