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1.采用聚合酶链式反应方法(PCR),以栝楼(TrichosanthinKirilowiiMaximowicz)基因组DNA为模板,设计、合成两对的寡聚核苷酸为引物,扩增出两DNA片段:一个为编码成熟天花粉蛋白的DNA片段(0.741kb称gene2)另一个包含gene2和编码23个氨基酸组成的分泌型信号肽及19个氨基酸组成的羧基端延伸因子的DNA片段(0.867kb称gene1).2.两个天花粉蛋白基因--一个编码成熟天花粉蛋白另一个编码含羧基端19个氨基酸在内的天花粉蛋白被重组到高效表达载体pGEX·KG并获高效表达,其表达量分别占细胞总蛋白的31﹪和51﹪.利用glutathioneagarose亲和层析方法和位点特异性蛋白酶(thromain)、两种天花粉蛋白被成功地从其融合蛋白中纯化出来.3.对天然和已纯化的两种重组天花粉蛋白进行生物学活性的比较研究表明,两重组天花粉蛋白显微注射都能抑制孕酮诱导的非州爪蟾(Xenopus laevis)卵母细胞胚泡破裂(germinalvesiclebreakdown)有效剂量为100pg.两种重组天花粉蛋白都能切割双链超螺旋DNA为线状和缺口环状.4、一定浓度的天花粉蛋白(25ug/ml)处理体外培养的胎盘绒毛膜上皮癌细胞,结果表明天花粉蛋白对绒癌细胞生长具明显的抑制作用.加药24hr天花粉蛋白在绒癌细胞中主要沿细胞核膜一侧以"新月形"冠状分布,而在Hela细胞中则以不规则弥散形分布.与此同时,绒癌细胞增殖受到抑制、细胞数量不增加或增加很少.