槟榔碱对口腔粘膜成纤维细胞uPARAP表达的影响

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目的:通过观察槟榔碱对体外培养的人口腔粘膜成纤维细胞uPARAP表达的影响,探讨槟榔碱在口腔粘膜下纤维性变发病过程中的作用机制。方法:取健康志愿者的口腔正常的粘膜,采用组织块培养法获得体外培养的成纤维细胞,取第3-10代细胞作为实验对象。取5个不同浓度组(Oμg/ml,5μg/ml,10μg/ml,25μg/ml,50μg/ml)的槟榔碱加入体外培养的正常牙龈成纤维细胞中,检测下列指标:1.采用四唑盐比色试验(MTT)检测不同浓度槟榔碱不同时间对口腔粘膜成纤维细胞增殖的影响。2.采用免疫荧光技术,检测不同浓度槟榔碱作用口腔粘膜成纤维细胞后,uPARAP蛋白表达的改变。3.采用流式细胞技术,检测不同浓度槟榔碱作用口腔粘膜成纤维细胞后,uPARAP蛋白表达的改变。结果:1.不同浓度槟榔碱干预口腔粘膜成纤维细胞后,结果显示:与对照组(即0μg/ml组)相比,5μg/ml组和10μg/ml组的增殖没有明显改变;而25μg/ml组和50μg/ml组则比对照组的增殖减慢,50μg/ml组增殖明显减慢。2.不同浓度的槟榔碱干预24小时后,浓度为5μg/ml,10μg/ml的槟榔碱轻微地抑制了成纤维细胞的uPARAP的表达,但是浓度为25μg/ml,50μg/ml的槟榔碱则明显地抑制uPARAP的表达。结论:1.槟榔碱浓度大于25μg/ml时具有抑制口腔粘膜成纤维细胞增殖作用。2.浓度大于25μg/ml时,槟榔碱明显抑制口腔粘膜成纤维细胞uPARAP的表达,将导致成纤维细胞胶原吞噬能力下降,可能是OSF发生、发展的机制之一。
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