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胃癌是源于胃上皮细胞的严重危害人类健康的恶性肿瘤之一，在我国，胃癌有着高发病率和致死率。因此，揭示胃癌发生机制，发现关键的肿瘤标志物，进而针对特异性的肿瘤标志物进行干预和调控，是防治胃癌的重要策略。 特异性microRNA（miRNA）表达异常可能是导致胃癌的重要机制之一，miRNAs通常在转录后水平调控基因表达，广泛参与细胞增殖、凋亡、发育分化等过程，并与包括肿瘤在内的多种人类重大疾病的发生密切相关。因此miRNAs已成为肿瘤研究领域的热点之一，验证肿瘤中异常表达的miRNAs所调控的靶基因，明确miRNAs在肿瘤发生中的作用机制，进而评估特定miRNAs在肿瘤治疗中的应用价值意义重大。 目的: 本文利用miRNAs微阵列芯片筛选出在胃癌中显著低表达的miR-320a，又通过全基因组芯片和在线数据库预测出其下游靶标Forkhead box M1(FoxM1)及FoxM1的下游分子P27KIP1，研究miR-320a通过靶向调控FoxM1-P27KIP1通路抑制胃癌发生发展的作用，并探讨其相关机制。 方法: 1.人胃癌组织样本研究 从山东大学齐鲁医院获得胃癌病人的胃癌组织和正常癌旁组织22对，利用免疫组化和实时定量PCR检测miR-320a和FoxM1的表达，并通过对比确定两者的相关性。 2.体外实验研究 2.1.利用miR-320a的mimics和inhibitor分别转染胃癌细胞系AGS、BGC-823、HGC，检测转染前后miR-320a的变化对FoxM1、P27KIP1的蛋白及mRNA表达的影响; 2.2.转染miR-320a的mimics和inhibitor后，检测胃癌细胞系AGS、BGC-823、HGC的克隆形成数的变化; 2.3.在FoxM1的3'UTR包含miR-320a的靶向结合序列，构建FoxM1的3'UTR质粒和3'UTR突变质粒，通过双荧光素酶实验检测转染miR-320amimics和3' UTR质粒/突变质粒的胃癌细胞荧光素酶活性变化; 2.4.通过回复实验检测转染miR-320a inhibitor和FoxM1的小干扰RNA后，FoxM1和P27KIP1的蛋白及mRNA表达变化以及克隆形成数的变化。 3.体内实验研究 选取8-10周龄裸鼠，皮下注射miR-320a稳定干扰的BGC-823，稳定生长一周后，每5天测量一次肿瘤体积并实时监测肿瘤生长情况，27天后处死并取瘤组织，利用免疫组化和实时定量PCR检测FoxM1和P27KIP1的表达变化。 结果: 1.MiR-320a在人胃癌组织中表达降低，与FoxM1的表达呈负相关关系。 1.1.提取胃癌与癌旁组织RNA进行qRT-PCR，检测发现与癌旁组织相比，miR-320a在胃癌组织中低表达(*P＜0.05)，FoxM1 mRNA在胃癌组织中高表达(*P＜0.05)。 1.2.对胃癌中miR-320与FoxM1 mRNA的表达做回归分析，发现miR-320a与FoxM1的表达呈负相关关系。 1.3.对临床病历资料进行分析，发现miR-320a与FoxM1 mRNA的表达与病人年龄、性别、肿瘤分化状态无关。 1.4.对胃癌与癌旁组织切片做免疫组化，发现在胃癌中随着FoxM1蛋白表达升高(**P＜0.01)，P27KIP1蛋白表达下降（**P＜0.01）。 2.MiR-320a负调控FoxM1的表达，正调控P27KIP1的表达，且miR-320a可以直接结合到FoxM1的3'UTR区。 2.1.在胃癌细胞系AGS、BGC-823、HGC中，转染miR-320a mimics可在mRNA和蛋白水平降低FoxM1的表达(*P＜0.05)，恢复P27KIP1的表达(*P＜0.05);而转染miR-320a inhibitor则可在mRNA和蛋白水平升高FoxM1的表达（*P＜0.05），降低P27KIP1的表达(*P＜0.05)。 2.2.MiR-320a受抑制可以提高FoxM1的蛋白水平（*P＜0.05），降低P27KIP1的蛋白水平（*P＜0.05），并且miR-320a对这两种蛋白水平的影响大于FoxM1siRNA对这两种蛋白水平的影响。 2.3.在胃癌细胞系AGS、BGC-823、HGC中，共转染miR-320a mimics和FoxM1野生型3'UTR质粒后，双荧光素酶活性与对照组相比减少了62％左右（*P＜0.05），而共转染miR-320a mimics和FoxM1突变型3'UTR质粒后，双荧光素酶活性与对照组相比无明显变化。 3.MiR-320a可调控胃癌细胞增殖。 3.1.在胃癌细胞系AGS、BGC-823、HGC中，转染miR-320a mimics使胃癌细胞克隆形成数减少（**P＜0.01），转染miR-320a inhibitor使胃癌细胞克隆形成数有所增多(**P＜0.01)。 3.2.转染miR-320a inhibitor使胃癌细胞克隆形成数有所增多（**P＜0.01），并且miR-320a inhibitor对克隆数的影响大于FoxM1 siRNA对克隆数的影响。 3.3.MiR-320a基因受抑制可以加快裸鼠体内肿瘤生长速度。 3.4.MiR-320a基因沉默能在mRNA和蛋白水平升高FoxM1的表达（**P＜0.01），降低P27KIP1的表达（**P＜0.01）。 结论: 1.MiR-320a在人胃癌组织中低表达，FoxM1在人胃癌组织中高表达，两者呈负相关关系。 2.MiR-320a直接作用于FoxM1的3'UTR区，抑制FoxM1的表达。 3.MiR-320a通过FoxM1-P27KIP1调控胃癌细胞增殖。 总而言之，miR-320a可与FoxM13'UTR的一段基序结合，抑制FoxM1的表达，并通过对FoxM1的抑制恢复P27KIP1的活性，最终抑制胃癌细胞增殖，提示miR-320a可能是一个潜在的胃癌治疗靶点，为胃癌的诊断、防治和预后提供了新思路。