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目的: 观察复方丹参方对大鼠肝脏和心脏细胞色素P450酶主要亚型的影响;研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponin,PNS)对心肌细胞H9c2 P450酶主要亚型mRNA水平表达的影响;初步探讨青蒿素治疗炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)的分子机制。 方法: 1.连续灌胃诱导处理28 d后取各处理组大鼠肝微粒体,将六种亚酶特异性底物探针与所提取微粒体共孵育,并用液质联用技术测定底物的代谢产物,分析CYP1A2,2B6,2C12,2C13,2D2和3A1亚型的活性, 2.用RT-PCR方法检测五种亚酶cyp1a2,2b1/2,2c11,2e1和3a1在 mRNA水平表达的变化。 3.利用Real Time荧光定量PCR技术检测各处理组大鼠心脏细胞色素P450酶各亚型mRNA水平表达的变化。 4.不同浓度的PNS处理心肌细胞H9c248 h,MTS法评价细胞的存活率,LDH释放率评价细胞损伤程度,Real Time荧光定量 PCR法检测 PNS各处理组对CYP450酶各亚型mRNA水平表达的变化。 5.在细胞水平细胞,选取了人结肠癌细胞株LS174T,以青蒿素对CYP3A4和PXR mRNA和蛋白表达的影响进行了研究。在动物水平,用葡聚糖硫酸钠(Dextran sodium sulfate,DSS)造炎症性肠病模型,给予青蒿素处理,研究青蒿素以孕烷受体(Pregnane X receptor,PXR)为靶点治疗炎症性肠病的分子机制。 结果: 1.复方丹参方对P450酶活性检测显示,苯巴比妥组对CYP2D2和3A1有抑制作用,对CYP1A2,2B6,2C12和2C13有诱导作用(P<0.05 or P<0.01);复方丹参方组对CYP1A2和2B6有抑制作用,对CYP2D2有诱导作用(P<0.05);丹参组对CYP1A2和2B6有抑制作用(P<0.05);三七组对CYP1A2,2B6,2C13和2D2有抑制作用(P<0.05 or P<0.01);冰片组对CYP1A2,2B6,2C12,2C13和2D2抑制有显著性差异(P<0.01),且抑制强度高于全方。在对肝脏 mRNA水平的影响方面,苯巴比妥组对cyp1a2和2b1/2的mRNA水平有诱导作用（P<0.05);复方丹参、丹参、三七组对cyp1a2,2b1/2,2c11,2e1和3a1亚酶mRNA水平的影响没有统计学意义;冰片组对cyp1a2,2b1/2和2c11的mRNA水平有抑制作用(P<0.05 or P<0.01)。 2.与空白组比较,复方丹参方对大鼠心脏CYP1B1,CYP2B1,CYP2E1,CYP4A1和CYP4F4的mRNA表达有下调趋势(P<0.05)。丹参对CYP1A1,CYP1B1,CYP2B1,CYP2C11,CYP2E1,CYP2J3,CYP4A1,CYP4F4和CYP4F5亚型的mRNA表达有下调趋势(P<0.05或P<0.01),而对CYP4A3,CYP4F1和CYP4F6的mRNA表达有上调趋势(P<0.05)。三七对CYP1A1,CYP1B1,CYP2B1,CYP2C11,CYP2E1,CYP2J3,CYP4A1,CYP4A3,CYP4F4,CYP4F5和CYP4F6的mRNA表达趋势均有不同程度的抑制趋势（P<0.05或P<0.01)。冰片对CYP1A1,CYP1B1,CYP2B1,CYP2C11,CYP4A1和CYP4F4的mRNA表达有下调作用(P<0.01)。 3.MTS结果表明随着PNS浓度的增大,细胞的存活率逐渐降低并呈浓度依赖性,IC50(5.28±0.08)mg·ml-1,同时LDH的释放率也逐渐增大。在对P450酶mRNA表达影响层面,PNS使CYP2J3,CYP4A1,CYP4A2,CYP4F1和CYP4F5表达上调(P<0.05或P<0.01);对CYP2C11,CYP4A3和CYP4F4表达下调(P<0.05或P<0.01),但高浓度时(5mg·ml-1)对CYP4A3和CYP4F4有上调作用(P<0.01)。 4.在细胞水平细胞,青蒿素可以诱导CYP3A4和PXR mRNA和蛋白的表达,通过凝胶迁移迁移率实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)实验,结果提示PXR与CYP3A4转录调控区的结合为特异性结合。在动物水平,青蒿素作为外源性配体有可能通过激活PXR受体进而通过诱导CYP3a11,CYP3a13,GSTα1和MDR1α,而减轻炎症性肠病症状,同时抑制CCR2,ICAM,IL-1β,IL-6,IL-10,iNOS,MCP-1和TNFаmRNA的表达,而达到治疗目的。 结论: 1.复方丹参方中各单药对酶的影响强于全方对酶的影响,其中以冰片对药物代谢酶的影响最为显著,复方使药物间产生相互作用的概率减少,有利于安全用药,从侧面反映出全方组方合理性。 2.复方丹参方全方对心脏P450酶mRNA表达影响弱于方中各单药对心脏P450酶的影响,显示复方对心脏P450酶影响可能是各单药作用的综合和叠加,同时全方及单药对CYP2家族和CYP4家族影响显示对心脏均有双向调节作用。 3.PNS对心脏和血管有一定的保护作用,高浓度(5mg·ml-1)的PNS对H9c2细胞有一定细胞毒作用,因此使用PNS时应注意用药剂量,使其发挥疗效而尽量减少药物不良反应的发生。 4.青蒿素可能是通过激活PXR从而达到治疗炎症性肠病的目的。