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目的： 1.构建小鼠U14宫颈癌皮下移植瘤模型，评价腺病毒介导的白介素28B联合3-溴丙酮酸对小鼠宫颈癌移植瘤的影响及其抗肿瘤作用的研究。 2.应用克隆技术将IL-28B的基因序列构建于真核表达载体上。 方法： 1.(1)培养小鼠U14宫颈癌细胞及HEK293细胞；(2)利用HEK293细胞对Ad-IL-28B及Ad-EGFP扩增；采用CPE法测定Ad-IL-28B及Ad-EGFP的滴度；(3)建立Babl/C小鼠U14的宫颈癌的腹水模型，抽取腹水进行皮下移植瘤的种植；(4)待移植瘤直径达3mm应用随机数字表对实验小鼠进行完全随机分配成5组，包括IL-2、Ad-mIL-28B、3-溴丙酮酸、3-溴丙酮酸+Ad-mIL-28B、Ad-EGFP及PBS组，观察移植瘤的大小变化，并计算其抑瘤率；(5)20天后处死，分离实验小鼠的脾脏，将各组小鼠的脾脏进行研磨，通过流式细胞术检测脾脏中的细胞因子CD4+CD25+FoxP3+Tregs的变化情况。 2.通过分子克隆技术，构建真核表达蛋白Ppic9k-IL-28B，使其在BMMY培养基中稳定表达并优化蛋白表达条件。 结果： 1.腺病毒介导的白介素28B联合3-溴丙酮酸对小鼠宫颈癌移植瘤的治疗作用。（1）采用CPE法测定Ad-mIL-28B以及Ad-EGFP的滴度均为108PFU/100ul。（2）成功建立了实验小鼠的腹水模型及皮下移植瘤模型。(3) Ad-mIL-28、IL-2、3-溴丙酮酸、3-溴丙酮酸+Ad-mIL-28B组处理后的实验小鼠的脾脏中的CD4+CD25+FoxP3+Tregs在淋巴细胞中所占比例分别为7.66％、5.69%、6.63%、2.64%，三溴丙酮酸+Ad-mIL-28B组与PBS组相比明显减少。（4）Ad-mIL-28、IL-2、3-溴丙酮酸、3-溴丙酮酸+Ad-mIL-28B组的肿瘤抑瘤率分别为59.18±16.89、62.57±16.28、75.28±3.37、79.23±3.82，3-溴丙酮酸+Ad-mIL-28B组小鼠的抑瘤率明显高于PBS组。 2.（1）成功构建了重组质粒Ppic9k-IL-28B。（2）建立了重组质粒Ppic9k-IL-28B的表达方法。 结论： 1.腺病毒介导的白介素28B联合3-溴丙酮酸对Treg细胞因子有下调的作用。腺病毒介导的白介素28B联合3-溴丙酮酸对小鼠移植瘤有抑制作用。 2.将IL-28B导入Ppic9k表达载体后，毕赤酵母GS115表达菌接受信号肽，IL-28B蛋白能正常的折叠和加工，正确的进行表达。成功构建出Ppic9k-IL-28B，并能在稳定的条件下将Ppic9k-IL-28B蛋白稳定表达。