肝癌恶性程度高，易复发，如何提高化疗和放疗的效果、防止肝癌术后复发是目前肝癌临床治疗面临的巨大挑战。　　 本文第一次报道建立并分析来源于同一病人原发及复发肝癌组织的两株不同细胞系。对这两株细胞的干细胞相关特性、化疗药物抗性以及免疫反应性进行比较，目的是检测：与原发来源的肝癌细胞系相比，复发来源的肝癌细胞系是否富集肿瘤干细胞?是否对化疗药物耐药性增强?是否可以被自体淋巴细胞有效识别和杀伤?　　 本文的研究内容以及结果有：(1)分析肿瘤细胞的HLA—ABDR多态性、染色体核型、肝癌特异性标志物的表达，证明这两株细胞是来自于同一个病人，而且是肝癌细胞系。(2)分析这两株细胞表达细胞角蛋白19(胆管细胞的标志)、肝分化相关基因以及可能的肝干细胞标志物的情况，结果表明原发和复发来源的肝癌细胞都具有肝细胞—胆管细胞双向分化潜能，复发来源的肝癌细胞分化程度低。(3)进行软琼脂克隆形成实验和SCID小鼠皮下成瘤实验，结果表明复发来源的肝癌细胞体内外克隆形成能力强，仅100个细胞就能在SCID小鼠体内成瘤，富含肿瘤干细胞。(4)利用芯片分析这两株细胞的基因表达谱，结果表明复发来源的肝癌细胞高表达干细胞特性相关基因、胞外基质蛋白酶的基因、多种生长因子基因以及促血管生成的基因，低表达胞外基质分子、多种细胞表面黏附分子以及凋亡相关基因。这些基因的表达特点解释了复发来源肝癌细胞富集肿瘤干细胞的原因，在小鼠体内侵袭生长和瘤体内血管丰富的原因，以及细胞形态特殊的原因。(5)利用MTT比较两株细胞的耐药性，结果表明复发来源肝癌细胞对DNA损伤药物的耐药性强。反转录PCR和免疫印迹的实验结果表明复发来源的肝癌细胞表达更高水平的PARP—1，利用小分子干扰RNA干扰PARP—1的表达后，复发来源的肝癌细胞对阿霉素的耐药性下降。(6)利用癌细胞作为靶细胞，自体肿瘤侵润淋巴细胞作为效应细胞，通过分析激活后淋巴细胞CD107a的表达和IFN—γ的产生，以及LDH细胞杀伤试验，比较这两株细胞的免疫反应性，结果表明虽然复发来源的肝癌细胞通过下调表达HLA一类分子，部分逃逸了CD8+T细胞的识别，但由于诱导了更多NK细胞的识别，原发和复发来源的肝癌细胞均可有效地被自体淋巴细胞识别和杀伤。　　 总之，本文的研究结果表明：与原发来源的肝癌细胞相比，复发来源的肝癌细胞分化程度低、恶性程度高、富集肿瘤干细胞；通过上调PARP—1的表达增强了对阿霉素的耐药性；但仍可有效地被自体淋巴细胞识别和杀伤。本文的研究提示肝癌干细胞可能是导致肝癌复发的原因，PARP—1是阿霉素耐药性的靶分子，免疫治疗可用于辅助治疗原发和复发肝癌。