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第一部分诺帝对HPV-16亚基因永生化人宫颈上皮细胞增殖,凋亡和分化的影响目的:研究诺帝（Nordy）对HPV16型亚基因（E6、E7）永生化人宫颈上皮细胞（H8细胞）增殖,分化和凋亡的影响作用及机制。方法:MTT法检测诺帝对H8细胞增殖的抑制作用;免疫细胞化学SP法检测微小染色体维持蛋白（minichromosome maintenance MCM）mcm5的表达;流式细胞术（FCM）和Annexin V-FITC法分析细胞周期和凋亡;光镜、电镜观察细胞形态变化。结果:①10umol/L、50umol/L、75 umol/L和100umol/L浓度的诺帝能够不同程度地抑制H8细胞增殖,且这种抑制作用呈剂量-时间依赖方式。②免疫细胞化学显示经100umol/L诺帝处理72h后,H8细胞核内mcm5蛋白表达明显减弱。③FCM结果显示: 10 umol/L、50 umol/L、75 umol/L、100 umol/L的诺帝处理H8细胞72h后,与对照组相比,G0/G1期细胞数明显增加,S期和G2/M期细胞数明显减少,并呈浓度依赖性,诺帝作用后H8细胞的增殖明显受到抑制,细胞被阻滞在G0/G1期。用100 umol/L和200umol/L诺帝处理H8细胞48h后,用Annexin V-FITC法分析,结果显示实验组细胞凋亡率（分别为12.322±0.786%和24.330±3.228 %）明显高于对照组细胞的凋亡率（3.478±1.519%）,差异具有显著性,这提示一定浓度的诺帝可以促进H8细胞凋亡的发生。④光镜下观察,诺帝作用H8细胞后,可见细胞体积变小且较规则,核分裂像明显减少,核/质比例下降。电镜观察细胞核变小变规则,异染色质增多,核逐渐成熟,成熟的线粒体,内质网等细胞器增多,细胞形态朝良性方向分化。同时细胞凋亡增多,出现明显的凋亡小体。结论:诺帝具有抑制H8细胞增殖,促进凋亡,诱导其分化作用,这种作用可能是通过诺帝抑制H8细胞在S期进行DNA合成,使细胞增殖受阻于G0/G1期,同时降低mcm5蛋白活性的表达来实现的。第二部分诺帝对永生化人宫颈上皮细胞HPV16 E6基因抑制作用的初步研究目的:研究诺帝（Nordy）对永生化人宫颈上皮细胞（H8细胞）HPV16 E6基因的抑制作用和机制。方法:免疫细胞化学SP法检测诺帝作用前后H8细胞E6蛋白和P53蛋白表达;RT-PCR检测诺帝作用前后HPV16E6 mRNA的表达情况。结果:①免疫细胞化学显示,E6和P53蛋白在对照组细胞内呈阳性表达,阳性物分别位于胞浆和胞核,经100umol/L诺帝处理72h后,H8细胞E6蛋白和P53蛋白表达明显减弱,与对照组相比,差异有显著性。②用浓度10umol/L、50umol/L、100umol/L、200umol/L诺帝处理H8细胞72小时后,浓度为10umol/L的诺帝作用后H8细胞的HPV16E6 mRNA的表达量与对照组的表达量无明显差异,而较高浓度的诺帝（50umol/L,100umol/L,200umol/L）处理H8细胞72小时后H8细胞的HPV16E6 mRNA的表达量相比对照组有明显降低,差异具有统计学意义（p<0.05）。结论:诺帝具有一定抑制HPV16病毒的作用,主要表现在抑制HPV16E6基因的mRNA的表达,进而影响E6基因的转录,导致病毒E6蛋白和P53蛋白表达降低。