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目的:
本实验通过复制失血性休克（无复苏）动物模型，应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、苏木精-伊红染色（HE染色）、免疫组织化学（IHC）及免疫印迹（Western Blot）方法检测失血性休克小鼠肺组织中TLR2mRNA、TLR4mRNA和TLR4蛋白表达变化，同时观察失血性休克肺组织病理变化。探讨TLR2、TLR4变化在失血性休克致肺组织损伤中的作用及临床意义。
方法:
C57BL/6小鼠45只，随机分为3组：通过心脏穿刺采取30％全血容量复制失血性休克（HS）模型，尾静脉注射5mg/kg脂多糖（LPS）复制LPS损伤模型（阳性对照组），仅给予心脏穿刺复制假手术组（Sham，阴性对照组）模型。在0h、1h、2h、4h、6h取出肺组织，通过RT-PCR、HE染色、IHC及Western Blot方法检测肺组织TLR2、TLR4的表达变化。
结果:
在失血性休克和LPS刺激后肺组织逐渐出现中性粒细胞浸润、红细胞渗出。正常肺组织中有TLR2mRNA、TI,R4mRNA的表达。在失血性休克和LPS刺激后0h、1h、2h、4h肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达逐渐增，失血性休克6h肺组织TLR2mRNA、TLR4 mRNA表达略下降，但仍高于假手术组。LPS刺激后6h肺组织TLR2mRNA表达下降较为明显，但高于假手术组。假手术组病理和TLR2mRNA、TLR4mRNA表达未出现明显改变。失血性休克1h、2h、4h后肺巨噬细胞、肺泡上皮细胞及肺间质TLR4蛋白表达逐渐增加，6h出现下降；而LPS刺激后1h、2h、4h、6h肺肺巨噬细胞、肺泡上皮细胞及肺间质TLR4蛋白表达逐渐增加。而假手术组未见TLR4蛋白表达。失血性休克后0h、1h、2h、4h肺组织TLR4蛋白表达逐渐增加，6h出现下降；LPS刺激4h和6h后肺组织TLR4蛋白表达逐渐下降，而假手术组未发生明显改变。
结论:
失血性休克和LPS刺激后迅速上调肺TLR2mRNA、TLR4mRNA和TLR4蛋白的表达，TLR2、TLR4与急性肺损伤（ALI）发生有一定的关系。失血性休克肺组织TLR2、TLR4变化增强了机体的非特异性免疫能力，同时增加了宿主对随后各种刺激的易感性。