【摘 要】
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目的:卵巢上皮癌的死亡率在各类妇科肿瘤中居于首位,是世界上最危险的女性恶性肿瘤之一,危害女性生命健康。由于临床症状不具有特性,缺乏有效的筛查手段,导致大部分肿瘤患者
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目的:卵巢上皮癌的死亡率在各类妇科肿瘤中居于首位,是世界上最危险的女性恶性肿瘤之一,危害女性生命健康。由于临床症状不具有特性,缺乏有效的筛查手段,导致大部分肿瘤患者在晚期被诊断,且术后复发和转移导致此类患者预后较差。因此探求治疗卵巢上皮癌的有效药物非常重要。据报道,毒胡萝卜素是多种肿瘤的有效抑制剂,能够通过干扰内质网内Ca2+稳态诱导癌细胞凋亡。本文研究毒胡萝卜素对卵巢癌细胞增殖、迁移侵袭及凋亡的影响及可能的作用机制。研究方法:利用噻唑蓝(MTT)试验法检测不同浓度毒胡萝卜素对卵巢癌细胞系OVCAR3和A2780活力的影响,并计算其半数抑制浓度(IC50),选择最佳剂量的毒胡萝卜素处理卵巢癌细胞。采用膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双染检测实验组与对照组细胞凋亡的情况,利用Fluo-3/AM活细胞染色,分析卵巢癌细胞胞浆钙离子水平的变化,细胞划痕和Transwell实验用于分析细胞迁移及侵袭能力的变化,运用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)操作和Western blotting分析相关指标在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果:我们发现不同浓度的毒胡萝卜素能够降低卵巢癌细胞系OVCAR3(0.03125-1.0μmol/L)和A2780(0.0625-2.0μmol/L)的细胞活力,且呈剂量依赖性。我们选取最适浓度进行相关试验。研究结果表明,毒胡萝卜素能够提高卵巢癌细胞的凋亡比率,增加细胞胞浆内Ca2+的浓度,降低细胞的迁移及侵袭能力。此外,毒胡萝卜素处理后,肌浆/内质网Ca2+-ATP酶2(SERCA2)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、凋亡抑制基因Survivin、B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-XL)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)的表达水平降低,转录因子C/EBP-同源蛋白(CHOP)表达水平增加。结论:毒胡萝卜素能够抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭,可能通过增加细胞内Ca2+的浓度诱导卵巢癌细胞凋亡,这为卵巢癌的诊治指引了一个新的方向。
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