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目的观察Smad3小干扰RNA（siRNA-Smad3）沉默肝星状细胞Smad3基因对肝星状细胞增殖、凋亡的影响，并探讨其可能的机制。方法1．选择大鼠肝星状细胞株（HSC-T6）作为研究对象，分别设立空白对照组、阴性对照组、siRNA-Smad3转染组。siRNA-Smad3转染HSC细胞株，转染24h、48h、72h、96h后，应用CCK-8检测各组HSC增殖的变化。2．选择大鼠肝星状细胞株（HSC-T6）作为研究对象，分别设立空白对照组、阴性对照组、siRNA-Smad3转染组。siRNA-Smad3转染HSC细胞株，转染24h、48h、72h后，应用Annexin-V/PI双标法流式细胞仪检测各组HSC的凋亡率。3．选择大鼠肝星状细胞株（HSC-T6）作为研究对象，分别设立空白对照组、阴性对照组、siRNA-Smad3转染组。siRNA-Smad3转染HSC细胞株，转染48h后收集细胞爬片，采用免疫细胞化学染色检测各组HSC凋亡相关蛋白P53、Bcl-2表达的变化。结果1. CCK-8检测siRNA-Smad3转染对HSC增殖的影响：24h、48h、72h转染组HSC增殖（0.27±0.03、0.53±0.03、0.97±0.09）受到显著抑制，与空白对照组（0.37±0.02、0.68±0.03、1.13±0.09）和阴性对照组（0.33±0.06、0.66±0.01、1.17±0.04）相比差异有统计学意义（P<0.01）。24h、48h、72h增殖抑制率分别为19%、20%、18%。96h转染组（1.40±0.08）HSC增殖与空白对照组（1.45±0.05）和阴性对照组（1.44±0.03）相比无明显变化（P>0.05）。各时间点空白对照组与阴性对照组相比HSC的增殖无明显变化（P>0.05）。2．流式细胞仪检测siRNA-Smad3转染对HSC凋亡的影响：24h、48h、72h转染组HSC凋亡率（8.76±1.41、24.25±2.82、12.71±1.53）%明显增高，与空白对照组（3.36±0.94、3.12±1.3、4.35±0.58）%和阴性对照组（4.46±0.33、4.17±0.58、4.99±0.77）%相比差异有统计学意义（P<0.01）。各时间点空白对照组与阴性对照组相比凋亡率无明显变化（P>0.05）。3．免疫细胞化学染色法检测siRNA-Smad3转染对HSC P53、Bcl-2蛋白表达的影响：转染48h后，各组细胞胞核（P53）或胞浆（Bcl-2）内均可见棕黄色颗粒沉积，P53、Bcl-2呈阳性表达。经图像软件分析显示：转染组P53蛋白表达（1.79±0.16）显著增多、Bcl-2蛋白表达（0.66±0.13）显著减少，与空白对照组（0.58±0.18、5.02±0.52）和阴性对照组（0.59±0.13、4.89±0.49）相比差异有统计学意义（P<0.01）。空白对照组与阴性对照组相比P53蛋白、Bcl-2蛋白表达无明显变化（P>0.05）。结论1. siRNA-Smad3沉默Smad3基因可以在一定时间（72h）内显著抑制HSC的增殖。96h其抑制增殖作用消失。2. siRNA-Smad3沉默Smad3基因能显著诱导HSC凋亡，其中48h诱导凋亡作用最明显。3. siRNA-Smad3沉默Smad3基因可能通过上调凋亡相关蛋白P53表达，下调Bcl-2的表达来发挥诱导凋亡的作用。4. Smad3沉默有望成为抗肝纤维化治疗的一个新途径。