海藻酸钠裂解酶的分离与纯化

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海藻酸钠是由α-L-古罗糖醛酸(α-L-guluronate)和其C5差向异构体β-D-甘露糖醛酸(β-D-mannuronate)聚合而成的线性粘多糖。海藻酸钠的组成可能是古罗糖醛酸和甘露糖醛酸的同聚物,或是交替排列的古罗糖醛酸、甘露糖醛酸聚合物,或是随机杂聚排列的古罗糖醛酸/甘露糖醛酸聚合物。由于海藻酸钠独特的物理化学性质,使的海藻酸钠在食品、化工、医药、农业等方面有着广泛应用。海藻酸钠裂解酶是通过β-消除机制在非还原末端C4、5之间形成不饱和双键而使而催化降解海藻酸钠,最后产生含有糖醛酸的寡糖混合物。海藻酸钠裂解酶的来源主要是微生物和海洋动植物,而且由于作用位点的不同海藻酸钠裂解酶具有不同的底物特异性。本文从腐败海带上的微生物筛选海藻酸钠分解菌菌株,并通过对16S rRNA基因的检测对菌株菌属进行鉴定。选择合适的海藻酸钠分解菌发酵培养,然后处理得到粗酶提取液,确定测定海藻酸钠裂解酶活性的方法,绘制蛋白质标准曲线,最后选择合适的分离方法对海藻酸钠裂解酶进行分离纯化。
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