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目 的:对成都地区286名冠心病患者和395名正常健康对照的APOA5基因三个已知单核苷酸多态(SNP)位点(-1131T>C、-12,238T>C、 S19W分别为SNP3、4、5)的多态性进行比较研究,探讨APOA5基因SNP3、4、5与血脂代谢及冠心病患病风险之间可能存在的相关性。方 法:聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction/restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)等方法。结 果:1 位于启动子区Mse1限制性酶切多态位点为-1131T>C,等位基因C(酶切产物为154bpDNA片段)T(酶切产物为133和21bpDNA片段)频率分别为0.223、0.777,与已报道的亚洲日本人群有显著差异(0.223vs0.34,0.777vs0.66,P<0.05),也显著高于欧洲高加索人群(0.223vs0.06,0.777vs0.94,P<0.05),说明亚洲人群中稀有等位基因C频率显著高于欧洲高加索人群。在CHD组与正常人群中的等位基因频率(T、C)以及三种基因型频率(TT、TC、CC)在两组间的分布均具有显著性差异(P<0.05),且表现为相同的变化趋势:等位基因T频率均显著高于等位基因C;TT基因型最常见,其次为TC基因型,CC基因型最少见。进一步统计分析表明,患者组中TC、CC基因型患者的血浆甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇水平(cholesterol,CHOL)较TT基因型患者显著增高,即携带稀有等位基因C的基因型与血浆TG、CHOL水<WP=4>平升高存在明显相关性(P<0.05),同高加索健康人群和日本健康人群中的研究结果相一致。2 位于APOA5/A4基因交界区的HaeIII限制性酶切多态位点为-12,238T>C,等位基因C(酶切产物为162bpDNA片段)T(酶切产物为141和21bpDNA片段)频率分别为0.626、0.374,与已报道的欧洲高加索人群(0.34,0.66)有显著差异(P<0.001),所报道的常见等位基因T的频率反而较稀有等位基因C低,即中国人群中等位基因C为常见等位基因。在冠心病患者组与正常对照组间等位基因频率的分布具显著性差异(P<0.05),均为等位基因T频率显著低于等位基因C,三种基因型(TT、TC、CC)在两组间的分布也具显著性差异(P<0.05)均为TC基因型最多,其次为CC基因型,TT基因型最少,与欧洲高加索人群的基因型分布也不相同(TC>TT>CC)。进一步统计分析表明:3种血脂指标(TG、CHOL、LDL)在冠心病患者组中3个基因型间的差异并无显著性,而CC基因型患者HDL-C水平较TC、CC基因型患者显著升高,即CC基因型与血浆HDL-C水平升高存在明显相关性(P<0.01)。3 第二外显子区的Taq1限制性酶切多态位点为c.56C>G,等位基因W(酶切产物为157bpDNA片段)S(酶切产物为134和23bpDNA片段)频率分别为0和1,即在中国正常人群中未发现W等位基因的存在,与已报道欧洲高加索人群相比有显著差异(0vs0.057,1vs0.943,P<0.05)。因在冠心病患者组中有14例SW基因型,故在患者组与正常人群中的SS、SW基因型分布有显著性差异(P<0.05), 2种等位基因频率在两组间的分布也具显著性差异。进一步统计分析表明:患者组两种基因型间各项血脂水平均未有显著差别(P>0.05),SS、SW基因型间TG、HDL-C水平呈上升趋势,CHOL、LDL-C水平呈下降趋势。结 论:位于启动子区的-1131T>C位点(SNP3)等位基因频率,基因型频率在冠心病组和正常对照组之间具显著性差异,等位基因C同血浆TG、CHOL水平升高存在明显相关性;位于APOA4/A5基因交界区域的-12.238T>C位点(SNP4)等位基因频率,基因型频率在冠心病组和正常对照组之间具显著性差异,CC基因型同血浆HDL-C水平升高存在明显相关性;位于第二外显子中的S19W位点(SNP5)等位基因频率在冠心病组与正常对照组之间分布具显著性差异,基因型频率在两组的分布也具显著性差异。提示该3个位点的多态性可能与作为心脏血管的危险因子的血脂代谢密切相关,<WP=5>与冠心病发病风险存在关联性,其中-1131T>C、-12,238T>C位点位于基因非编码区,不会对该基因表达起直接作用,推测它们可能与其他功能性位点处于连锁不平衡状态,但其作用机理目前尚需进一步研究;而S19W位点位于第二外显子中,二态的变异引起了编码氨基酸的改变,能够直接影响APOAV蛋白的表达,但其具体作用机理有待深入研究。