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原始生殖细胞(Prmordial germ cells，PGCs)是生殖细胞的祖细胞，存于8.5—13.5dpc(days post coitum)的鼠胚，具有迁移、增殖和性别分化等特性.近年研究证明PGCs发育过程中发生着大量的DNA及组蛋白的修饰，说明PGCs的特性可能与表观遗传修饰相关，从组蛋白变体角度分析是表观遗传学研究新的热点.本实验通过间接免疫荧光检测了不同发育时期舍有PGCs的组织石蜡切片、单细胞及培养两天的PGCs中组蛋白H2A三种变体-macroH2A、H2A.X和H2A.Z的分布.研究结果如下：
1.免疫荧光检测小鼠PGCs中组蛋白H2A变体的分布
分别采集8.5-13.5dpc五个时间段的含有PGCs的胚胎组织和PGCs单细胞，对组织进行石蜡切片间接免疫荧光，对单细胞进行间接免疫荧光检测.macroH2A在PGCs进入生殖嵴(10.5dpc)和性别分化以后(13.5dpc)，分布状态发生变化；H2A.X在性别分化后(13.5dpc)分布发生变化；H2A.Z在进入生殖嵴和性别分化过程中(12.5dpc)及以后(13.5dpc)分布发生变动.说明组蛋白H2A的这三种变体确实参与了PGCs的发育。
2.免疫荧光检测培养后PGCs中组蛋白H2A变体的分布
采集主要时间段的小鼠PGCs体外培养两天，分别将体外培养1d和2d的PGCs通过间接免疫荧光检测组蛋白H2A三种变体的分布，以体内同期的PGCs做标准对照，结果发现：macroH2A的分布在培养的细胞中较对照细胞迟缓；H2A.Z分布基本与对照基本一致；H2A.X在培养的进入生殖嵴前(8.5dpc)的PGCs中很快消失，之后各阶段培养的PGCs中H2A.X分布基本正常.另外，实验还发现，11.5dpc时PGCs的性别发育方向可能已确定。