鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是目前在水产养殖业中具有极大危害的革兰氏阴性病原菌。随着我国水产养殖规模的逐步扩大，各种问题也随之显露出来，其中鱼类病害问题造成的经济损失尤为严重。抗生素的滥用会导致许多负面效应，使得免疫接种再次成为疾病控制的主要策略。多效价疫苗开发的新策略之一，就是以病原体细菌的减毒活菌为载体，通过引入质粒介导外源抗原表达来开发多价疫苗。因此在减毒细菌中建立一种稳定的质粒介导外源蛋白表达系统是多价疫苗开发工作的重要内容。　　 在我们实验室的前期工作中，已经通过基因工程手段构建了一株鳗弧菌减毒活疫苗MVAV6203。在本研究中，以该菌株为宿主，构建了八个不同复制子来源的质粒用于介导外源蛋白表达。选取GFP报告蛋白和来源于嗜水气单胞菌的GAPDH蛋白为靶标蛋白，将两者的编码基因分别与体内诱导启动子Pviua融合后插入到质粒表达系统中，成功构建了8个GFP表达菌株和8个GAPDH表达菌株，后续的质粒稳定性测定和蛋白表达相关检测实验表明，拥有pAT153来源复制子的pUTat质粒能够在体外无抗培养条件下稳定地传代并持续表达外源蛋白GFP和GAPDH。以斑马鱼幼鱼为动物模型，进一步研究了pUTat质粒介导外源蛋白GFP表达系统的稳定性，实验结果表明，以浸泡方式进入鱼体后，pUTat在体内5天内仍然能稳定持续地表达外源蛋白GFP，具有潜在的开发应用价值。