斜入射光反射差法无标记研究蛋白质分子之间的相互作用

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生物芯片技术被称为20世纪具有划时代意义的微量分析技术之一。目前,以荧光探测为代表的标记方法是生物芯片探测技术的主流方法。它有着灵敏度高,可实现高通量探测等优点。但是,在探针分子上修饰荧光分子后,可能改变其结构与功能。此外,荧光探测方法很难给出结合力常量这个重要参数。该参数可以给出两种分子之间结合快慢及它们之间亲和力的大小。该参数在药物筛选中有着重要应用,它可以用来表征药物与病原体作用的快慢与强弱。虽然,表面等离子体共振方法也能获得结合力常数,但是,该方法事先要对玻片进行金膜修饰,并且很难实现高通量检测。因此,发展一种无标记高通量探测生物芯片的技术是一个巨大的挑战,若能在该方面取得突破,无疑将对生命科学产生革命性的影响。为此,我们课题组独立发展一种无标记、高通量、实时检测生物芯片的新方法——斜入射光反射差法。  本论文采用斜入射光反射差(OIRD)技术,分别无标记研究了不同浓度的Mouse IgG,Rabbit IgG及(牛血清白蛋白)BSA与醛基玻片(VALS)上的活化基团的结合。重点无标记研究了Swine-IgG与GoatAnti-swine IgG的相互作用,通过拟合其动力学曲线,计算出Swine IgG与GoatAnti-Swine IgG在室温下的结合力常数。本论文的研究结果说明,OIRD方法在无标记、实时研究生物大分子之间相互作用并获得其动力学信息方面是可行的并有极大的应用潜力。  本论文取得以下主要研究结果:  1.利用OIRD技术在室温(22℃)下无标记实时监测了不同浓度的Mouse-IgG,Rabbit-IgG及BSA(牛血清白蛋白)与醛基玻片(VALS)上的功能团结合的动态过程,并测出其结合时间常数。  2.利用OIRD技术在室温(22℃)下无标记实时监测不同浓度的的GoatAnti-Swine-IgG与Swine-IgG结合的动态过程,并得到其室温下结合力常数约为1620.77M-1·s-1。  3.我还参与了钙钛矿结构锰氧化合物输运机制的研究。该工作的主要结果:采用Monte Carlo及广度优先算法计算模拟外加压力、磁场对La1-xSrxMnO3(x=0.175)单晶的输运机制的影响。我们发现上外加压强对体系的低温剩余电阻率、高温剩余电阻率、激活能及电子之间散射的影响比磁场要大,而外磁场主要影响磁散射及体系的居里温度。此外,我们还发现小极化子输运机制在高温区的顺磁绝缘相中起主导作用。
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