免疫亲和柱（IAC）是利用抗原与抗体的特异性结合而建立的一种样品前处理方法，常用于色谱分离与分析。利用被测物的反应原性、抗原抗体结合的特异性以及抗原抗体复合物在一定条件下能可逆解离的性质进行色谱分离。采用琼脂凝胶与抗体偶联形成免疫吸附剂。本文以IAC为分离富集手段，在对IAC进行一系列条件优化实验后，分别建立了高效液相色谱法测定食品中两类兽药残留的新方法。主要研究内容包括：(1)基于免疫亲和色谱分离的三苯甲烷类残留检测方法研究建立了一种免疫亲和柱-高效液相色谱法测定鱼肉中的孔雀石绿，结晶紫，隐性孔雀石绿和隐性结晶紫的方法。实验采用乙腈-乙酸铵缓冲体系同时从鱼肉中提取四种目标分析物，然后用2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4苯醌将其中的隐性孔雀石绿和隐性结晶紫定量地氧化为孔雀石绿和结晶紫。随之，用免疫亲和柱净化富集上述溶液，洗脱物被用来做高效液相测定。本方法对于孔雀石绿，结晶紫，隐性孔雀石绿，隐性结晶紫的检测限分别为：0.15，0.1，0.18，0.14ng/g。在0.5-10ng/g的浓度范围内采用标准加入法测得四种目标分析物的平均回收率在71.6%–96.8%之间，精密度为5.1–12.3%(n=6)。同时，用高效液相色谱-质谱法验证了本方法测得结果的准确性。(2)基于免疫亲和色谱分离的16种磺胺类残留检测方法研究建立了牛奶和奶粉中16种磺胺残留物的高效液相色谱-紫外检测器快速测定方法。样品用乙酸乙酯提取，所得清液经免疫亲和柱净化富集，流动相为甲醇和1.1%乙酸-0.01mol PBS溶液(梯度洗脱)，应用液相色谱-紫外法检测。该方法的回收率为80–110%，相对标准偏差小于10%；检测牛奶样品的灵敏度为0.5μg/L，奶粉样品的灵敏度为5.0μg/kg。