威灵仙为毛茛科铁线莲属植物威灵仙(Clematis chinensis Osbeck.)、棉团铁线莲(Clematis hexapctala Pall.)或东北铁线莲(Clematis manshurica Rupr.)的干燥根及根茎,临床用于治疗风湿痹痛,肢体麻木,筋脉拘挛,屈伸不利。已有关于威灵仙化学成分及其活性作用的研究报道甚多,但其有效成分仍未明确。深入研究阐释其药效物质基础对于威灵仙的科学开发与质量控制有着重要意义。本文根据威灵仙临床水煎剂外敷给药的用法,开展威灵仙水溶性成分的化学物质基础研究;在此基础上采用体外透皮模型研究其水溶性成分的体外透皮行为,初步筛选其活性成分,为进一步研究揭示威灵仙药效物质提供科学依据。本论文首先开展了威灵仙药材的HPLC指纹图谱研究。在前期研究基础上,优化建立了水回流提取最佳工艺和HPLC分析方法,基于15批不同产地、基原和市场来源的药材,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》建立其对照指纹图谱,共标示16个指纹峰。研究结果表明,不同产地、基原和市场来源威灵仙水提物的整体化学成分组成相似。构建的威灵仙HPLC指纹图谱特征性明显,可用于混伪品的区分。在此基础上研究阐释指纹图谱的物质基础。运用UPLC-Q-TOF和HPLC方法对指纹图谱的化学组成进行定性定量分析。结合文献数据及标准品比对共鉴定出指纹图谱中的8个标示谱峰共计12个成分,包括8个酚酸类化合物和4个三萜皂苷。其中,3个异绿原酸化合物为首次在威灵仙中报道;建立了同时测定8种酚酸类化合物的HPLC分析方法,并进行了方法学验证。咖啡酸和化合物HX是所有批次药材的共有成分。药店来源药材的总酚酸含量明显低于药材市场来源药材。最后,本论文基于体外透皮特性开展了威灵仙活性成分的筛选研究。采用HPLC指纹图谱分析方法考察威灵仙水提物的体外透皮行为,通过优化模型参数和试验条件,发现主要透皮成分为化合物HX。在此基础上,考察了浓度及p H值对化合物HX透皮行为的影响。结果表明采用脱脂小鼠腹部皮肤,以10%乙醇-生理盐水为接受液,透皮时间8 h后,威灵仙水提物的主要透皮成分为化合物HX,其透皮量与浓度呈正相关,与p H值呈负相关。本论文研究结果对于深入研究揭示威灵仙的药效物质基础提供了可靠的科学资料,具有一定的科学价值。