论文部分内容阅读
细胞内pH值对细胞的生理活动有重要影响，由细胞内pH值变化可监测细胞内的生理活动，如吞噬作用、内吞作用等。pH值的变化对神经系统也有巨大影响，可影响突触传递、神经元的兴奋性、细胞间的耦合等过程。因此，测定细胞内的pH值日益引起人们的高度重视。荧光分子探针由于其独特的结构性质，并且具有灵敏度高，操作条件温和等优势，突破了传统pH值测试方法的局限，从而引起人们的极大关注。
本论文首先通过将含有8-氨基喹啉与荧光素衍生物缩合的席夫碱QZl与铕(Ⅲ)的TTA(噻吩基三氟乙酰丙酮)化合物作为基本原料合成了新的铕(Ⅲ)-荧光素化合物Eu-QZ1，并对其进行了光谱表征。化合物Eu-QZ1在470nm光的激发下产生荧光素的特征绿色荧光(530nm)。在标准的从碱到酸(pH从9.5到6.5)滴定过程中该荧光的强度增强了接近8倍，其pKa值计算为7.30。在370nm光的激发下，Eu-QZ1发射稀土铕(Ⅲ)离子的特征红色荧光(主峰位于612 nm)。在标准的从酸到碱(pH从5.5到8.5)滴定过程中，该荧光的强度增强了接近10倍，其pKa值计算为7.39。这些结果表明Eu-QZ1是一个高灵敏度双荧光响应的pH探针，其pKa值表明Eu-OZ1可以用来测定低限达40nM的氢离子浓度。细胞试验表明Eu-QZ1具有良好的细胞通透性，能够在红光和绿光两个位置标记海拉细胞中的pH范围。
在上述研究基础上，合成一种新型的稀土-罗丹明双重荧光响应pH探针分子Eu-DR1。Eu-DR1由发射绿光的罗丹明基团、发射红光的稀土Eu(TTA)3、发射蓝光的4-(二甲氨基)苯甲醛基团构成。在不同波长的光激发下，化合物发射不同颜色的光，有红色、白色、绿色。在标准pH值从6.5到4.0滴定过程中，罗丹明绿色荧光的强度增强了接近40倍，量子产率提高到0.70，溶液的颜色也有黄色变成了红色。pH从8.5到6.5滴定过程中，Eu红色荧光的强度增强了接近30倍，其pKa值计算为7.20。Eu-DR1是一种新型的双荧光响应的pH探针分子。对活细胞内pH值的测试研究有重要意义。