疟疾(Malaria)是一种严重危害人类健康的传染性寄生虫病,由疟原虫经按蚊传播引起。世界卫生组织(WHO)最新报告,2016年仍有2.16亿疟疾病例爆发,其中死亡人数达44.5万,分布在全球的91个国家。约90%的疟疾病例和死亡人数发生在非洲。恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)是感染人类的四种疟原虫中最为致命的,其主要流行于非洲国家。简便准确的快速及时诊断技术对疟疾的防治有重要意义,可指导准确用药,避免耐药和病情恶化,还可监控和预防疟疾的大规模暴发流行。富组氨酸蛋白2(Histidine-rich protein 2,HRP2)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)是恶性疟原虫检测中常用的两种标志物。HRP2因其具有较高的灵敏度,从而在恶性疟原虫的检测中具有更广泛的应用,而LDH可以作为HRP2基因缺失的疟原虫的检测标志物。因此,试剂若能同时检出两种标志物,则可避免单一标志物检测的不足,具有更高的敏感性。本课题采用胶体金免疫层析技术及双抗体夹心法,研制成功了一种用于检测人血液中恶性疟原虫特异性HRP2和LDH的快速诊断试剂(RDT)。并进行了工艺体系优化,分析性能评估,及临床试验。结果表明本试剂最低可检出恶性疟原虫虫体密度为100虫体/微升血。以金标准方法厚薄血膜涂片显微镜检查法作为对照,本方法检测1110例临床样本,结果阳性符合率为99.47%,阴性符合率为100%,而镜检总体符合率为99.82%。本试剂操作简单,无需仪器,检测时间只需15min,特异性好,敏感度高,能够满足快速、简便、准确检测恶性疟原虫感染的需求。