金银花类药材抗氧化抗菌活性研究

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金银花类药材是我国常用中药,具有清热解毒、凉散风热之功效,用于治疗风热感冒、温病发热、痈肿疔疮、喉痹、丹毒血痢等症,药用历史悠久。从2005年版《中国药典》开始将金银花和山银花分开收载。2010年版《中华人民共和国药典》一部收载忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花为金银花正品药材,而忍冬科植物灰毡毛忍冬L.macranthoides Hand.-Mazz、红腺忍冬L.hypoglauca Miq.及华南忍冬L.confusa DC.黄褐毛忍冬、L.fulvotomentosa Hsu et S.C.Cheng的干燥花蕾或带初开的花则为山银花。本论文在文献研究及借鉴前人研究的基础上,对金银花类药材抗氧化性和抗菌活性进行研究。具体如下:  1.金银花类药材抗氧化活性研究  第一节,采用DPPH-HPLC-DAD-TOF/MS方法,利用DPPH反应前后颜色颜色变化,化合物反应前后峰面积的改变,利用飞行质谱强大的定性功能,成功应用于金银花类药材中抗氧化成分的筛选,从中筛选和鉴定了12个天然抗氧化成分,分别为新绿原酸(P1)、绿原酸(P2)、隐绿原酸(P3)、咖啡酰奎宁酸(P4)、异绿原酸B(P5)、异绿原酸A(P6)、异绿原酸C(P7)、芦丁(F1)、忍冬苷(F2)、异槲皮苷(F3)、木犀草苷(F4)和木犀草素(F5)。这些活性成分可能是金银花抗氧化活性的药效物质基础。同时采用DPPH-紫外分光光度法利用酶标仪对筛选出的若干代表性化合物清除自由基活性进行了验证,进一步验证了该方法的科学性。  第二节,对不同来源的金银花类药材提取液的抗氧化活性进行测定,同时对各个种药材的主要抗氧化活性成分含量进行研究,将抗氧化活性能力与物质基础含量相挂钩。活性测定结果:不同来源的金银花类药材以黄褐毛忍冬提取液活性最高,忍冬最差,活性顺序依次为黄褐毛忍冬>灰毡毛忍冬>红腺忍冬>华南忍冬>忍冬,即山银花>金银花。含量测定结果:咖啡酰奎宁酸类总含量,灰毡毛忍冬>黄褐毛忍冬>红腺忍冬>华南忍冬>忍冬;单咖啡酰奎宁酸类含量,灰毡毛忍冬>华南忍冬>红腺忍冬>黄褐毛忍冬≈忍冬;双咖啡酰奎宁酸类含量,黄褐毛忍冬>灰毡毛忍冬>红腺忍冬>华南忍冬>忍冬。  2.金银花类药材抗菌活性初步研究  以金银花类药材抗菌活性为切入点,采用琼脂平板稀释法进行体外抗菌研究。结果表明,金银花及山银花多基源品种的抗菌活性强弱顺序为:黄褐毛忍冬>红腺忍冬>华南忍冬≈灰毡毛忍冬>忍冬,山银花抗菌活性优于金银花。同一来源的药材提取液对同一菌种不同菌株的抑菌活性存在显著差异。不同来源的药材提取液对同一菌株的抑菌活性差异也很明显。为临床上金银花类药材用于抗菌治疗提供了体外实验依据。
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