多药耐药(multidrug resistance，MDR)是指肿瘤细胞对一种化疗药物出现耐药的同时，对其他结构不同、作用靶位不同的化疗药物亦产生抗药性，是肿瘤化疗失败和复发的根源。多药耐药的产生是多机制作用多基因参与的复杂过程，ATP结合盒(ATP Binding Cassette，ABC)家族基因过表达已被证明是MDR产生的重要原因，MDR1是ABC家族中最早被发现，影响最广泛，最为重要的MDR相关基因，围绕MDR1的MDR机理研究及逆转MDR研究的重要性日益凸显。 多药耐药作为肿瘤化疗中的常见现象，当今仍然是化疗失败和肿瘤病人死亡的最主要原因之一。针对肿瘤MDR的产生过程，应用多药耐药逆转剂是解决肿瘤MDR的主要手段。经过二十多年的开发研究，已发现大量具有MDR逆转活性的化合物，主要包括：钙通道阻滞剂(维拉帕米及其衍生物)、钙调蛋白抑制剂(噻吩嗪类化合物)、免疫抑制剂(环孢菌素A及其衍生物)、类固醇和激素类似物(黄体酮、甲地孕酮)等。但这类逆转剂的毒副作用也使其临床应用受到限制。 中药当归龙荟丸可有效治疗有效治疗慢性粒细胞性白血病，我室以其有效成分靛玉红为模板，经定量构效关系研究，从合成的几十种衍生物中筛选出PHⅡ—7。本实验是对其活性和作用机理进行研究。首先，在杀伤活性试验中，我们通过MTT实验发现PHⅡ—7对K562细胞及其耐药株K562/A02均有明显的杀伤作用，且IC50相近。而K562/A02对作为阳性对照的阿霉素的IC50值则比K562高出近百倍应用表达谱芯片AFFYMETRIX Genome u133 plus2.0辅以SYBR GREEN REALTIME PCR验证，研究PHⅡ—7作用前后的前述两细胞系发现，经典多药耐药基因MDR1表达量下调，与其磷酸化和功能密切相关的基因PKCA显著下调。与S期细胞周期阻滞、凋亡、细胞衰老密切相关的P21，CHK1等基因显著上调。激光共聚焦成像发现PHⅡ—7作用后K562/A02细胞内ADM蓄积明显增加，流式细胞术发现这种增加呈时间依赖性。凋亡和周期实验证明PHⅡ—7作用后细胞周期发生阻滞，细胞凋亡增加。PHⅡ—7可以抑制经典耐药基因MDR1的表达，并可显著抑制PKCA的表达，通过使用SiRNA沉默PKCA的表达发现，K562/A02细胞中PKCA的下调可导致c—FOS，c—JUN和MDR1基因的显著下调，提示PHⅡ—7通过PKCA—AP1—MDR1信号通路下调MDR1基因的表达，从而逆转耐药肿瘤细胞的耐药状态。并通过作用于有关基因导致细胞周期阻滞，并诱导凋亡。PHⅡ—7同时具备了内在肿瘤细胞杀伤活性和通过PKCA通路影响MDR1基因的表达从而具备逆转耐药表型的活性，有可能成为克服肿瘤化疗中多药耐药现象的一种新的解决方案。