Ⅲ型磷脂酰肌醇3-激酶(PIK3C3),又称为Vps34,是唯一一个第三类磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),它的特异性底物是磷脂酰肌醇。Vps34是唯一一个从低等真核生物、植物到哺乳动物保守的磷脂酰肌醇3-激酶,代表着PI3K的最古老形式。研究表明Vps34在一些细胞内的生物过程中发挥重要的调节作用,包括内吞作用、内吞体-高尔基体的膜运输、mTOR/S6KI信号通路和自噬等。Vps34与Vps15、Beclin1及其他亚基形成复合体,通过磷酸化生成磷脂酰肌醇3-磷酸(PtdIns3P)向下游的效应器传递信号。PtdIns3P含有一个结合位点,可以与包含某些特定结合结构域的蛋白相结合。这些蛋白质大多数包含FYVE[Fab1,YOTB,Vac1,EEA1]结构域或PX结构域。以往研究发现,Vps34在小鼠神经、肝脏、心脏、肾脏和骨骼肌等组织的正常生理功能中发挥重要作用。为了研究Vps34在小鼠卵母细胞中的作用,我们构建了卵母细胞特异性敲除Vps34的小鼠模型,并通过分离3周小鼠的卵母细胞验证了敲除效率。8周成年雌鼠持续六个月的生育力监测实验表明,卵母细胞特异性敲除Vps34的雌鼠是不育的。然后我们针对3周、5周和6周小鼠进行了一系列体外实验:超数排卵实验表明Vps34-cKO小鼠可以正常排卵,且实验组与对照组相比排卵数量无异常,但是在5周的卵母细胞的胞质中发现空泡样的存在,6周空泡的比例更高;IVF实验表明,3周龄Vps34-cKO小鼠卵母细胞可以正常受精,囊胚率稍有下降,5周和6周龄Vps34-cKO小鼠卵母细胞可以受精,只有少部分可以发育至囊胚。此外,我们对3周、5周小鼠分别进行了 IVF-ET实验,发现3周实验组受体鼠的后代出生率与对照组无明显区别,5周也有正常的后代出生。镜下观察Vps34-cKO小鼠的卵巢切片可发现特异性存在于卵母细胞胞质中的空泡,这种空泡开始出现于5周龄实验组的卵巢切片中,并且主要存在于有腔卵泡中,并且空泡比例随小鼠年龄增长而增大,只有6个月的卵巢切片中可以发现少量出现在次级卵泡中的空泡。综合所有实验结果,Vps34特异性敲除小鼠在早期尚有正常的生育能力,但是随着小鼠年龄的增长生育能力逐渐下降,直至8周成年时小鼠的生育能力基本丧失。并且随着小鼠年龄的增长,卵母细胞出现特异性空泡的比例增加。因此,Vps34在小鼠卵母细胞生理功能中发挥重要的作用,其具体的作用机制有待进一步的研究。