【摘 要】
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本试验利用腹腔注射脂多糖（LPS）诱导建立断奶仔猪的肠道炎症模型,通过测定血清炎性细胞因子水平、肠道组织病理学评分、肠上皮细胞凋亡状况以及内质网应激相关基因表达水平,旨在研究德氏乳杆菌（Lactobacillus delbrueckii,LD）通过调控内质网应激反应缓解断奶仔猪肠道炎症的作用机制。试验选用平均体重为7 kg左右健康的三元杂交（杜×长×大）断奶仔猪（公）36头,随机分为3个组,分别为
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本试验利用腹腔注射脂多糖（LPS）诱导建立断奶仔猪的肠道炎症模型,通过测定血清炎性细胞因子水平、肠道组织病理学评分、肠上皮细胞凋亡状况以及内质网应激相关基因表达水平,旨在研究德氏乳杆菌（Lactobacillus delbrueckii,LD）通过调控内质网应激反应缓解断奶仔猪肠道炎症的作用机制。试验选用平均体重为7 kg左右健康的三元杂交（杜×长×大）断奶仔猪（公）36头,随机分为3个组,分别为对照组、LPS组和德氏乳杆菌组,每组6个重复,每个重复2头猪。对照组和LPS组饲喂基础饲粮,德氏乳杆菌组饲粮在基础饲粮中添加0.2%德氏乳杆菌制剂。预饲期3d,试验期28d。试验第29d,对LPS组和德氏乳杆菌组仔猪分别腹腔注射100μg/kg体重的LPS溶液（生理盐水配制）,对照组仔猪注射等量生理盐水。于第29d,各组每个重复随机选择1头猪,前腔静脉采血后屠宰,取肠道黏膜和肠段,测定血清、肠段和肠黏膜相关指标。试验结果表明:1)德氏乳杆菌对LPS免疫应激断奶仔猪血清炎性细胞因子的影响:与对照组相比,LPS组血清促炎细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12和TNF-α浓度显著升高（P<0.05）,抗炎细胞因子IL-10浓度显著降低,而德氏乳杆菌组中血清IL-1β、IL-6和IL-12浓度与LPS组相比有不同程度的降低（P<0.05）。然而,血清中IL-4、IFN-γ和TGF-β浓度在三组之间无显著差异（P>0.05）。2)德氏乳杆菌对LPS免疫应激断奶仔猪肠道组织损伤评分的影响:LPS组空肠和回肠组织损伤评分极显著高于对照组（P<0.01）,而德氏乳杆菌组空肠和回肠组织损伤评分较LPS组显著降低（P<0.01）,但仍高于对照组（P<0.01）。3)德氏乳杆菌对LPS免疫应激断奶仔猪肠道炎性细胞浸润的影响:与对照组相比,LPS组空肠和回肠黏膜中MPO、Mac2含量均极显著升高（P<0.01）;而德氏乳杆菌组空肠和回肠黏膜中MPO、Mac2含量较LPS组均显著降低（P<0.01）,其中,空肠黏膜中MPO、Mac2和回肠黏膜中MPO含量仍显著高于对照组（P<0.01）,回肠黏膜中Mac2含量与对照组差异不显著。4)德氏乳杆菌对LPS免疫应激断奶仔猪肠上皮细胞凋亡的影响:与对照组相比,LPS组中空肠和回肠细胞凋亡率均极显著升高（P<0.01）;与LPS组相比,德氏乳杆菌组空肠和回肠细胞凋亡率极显著降低（P<0.01）,但仍明显高于对照组（P<0.01）。5)德氏乳杆菌对LPS刺激断奶仔猪肠道内质网应激和凋亡相关基因m RNA表达水平的影响:与对照组相比,LPS组可显著提高回肠组织中内质网应激相关基因GRP78、PERK和ATF6 m RNA表达量（P<0.05）,而德氏乳杆菌组中PERK和ATF6 m RNA表达量较LPS组显著降低（P<0.05）,德氏乳杆菌组中GRP78较LPS组也有降低的趋势;但空肠组织中检测的内质网应激相关基因在三组之间无显著差异（P>0.05）。在检测的细胞凋亡相关基因中,LPS组空肠和回肠BAX、caspase3和CHOP m RNA表达量较对照组显著升高（P<0.05）或有升高的趋势;与LPS组相比,德氏乳杆菌组空肠CHOP和回肠caspase3、CHOP m RNA表达量有所降低。LPS组回肠Bcl-2 m RNA表达量较对照组显著降低（P<0.05）,而德氏乳杆菌组显著提高了其表达量且与对照组无差异,但空肠Bcl-2 m RNA表达量在三组之间差异不显著。6)徳氏乳杆菌对LPS免疫应激断奶仔猪肠道炎症和内质网应激相关蛋白的影响:与对照组相比,LPS组空肠和回肠组织中细胞发生NF-κB的核转移情况明显增多,而德氏乳杆菌组的NF-κB核转移较LPS组有所减少。此外,与对照组相比,LPS组显著上调了空肠组织中内质网应激相关蛋白GRP78、p-IRE1α和回肠组织中GRP78、p-IRE1α和IRE1α的表达（P<0.05）。而德氏乳杆菌组空肠和回肠组织中p-IRE1α以及回肠组织中GRP78的蛋白表达水平较LPS组有不同程度的降低（P<0.05）。综上所述,饲粮中添加德氏乳杆菌可缓解肠上皮细胞内质网应激及细胞凋亡,并减轻因LPS诱导的肠道炎症损伤,IRE1α-NF-κB信号通路可能参与其中的调控作用。
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